[发明专利]一种提高肿瘤细胞放疗敏感性的方法

说明书

本发明涉及一种提高肿瘤细胞放疗敏感性的方法，具体公开了一种通过抑制抗凋亡蛋白Bcl‑xL触发铁死亡信号而提高肿瘤细胞放疗敏感性的技术方法。本发明主要解决由于凋亡信号缺失或紊乱造成的放疗抵抗问题。本发明通过促进肿瘤细胞铁死亡实现，具体包括通过基因敲除或小干扰RNA技术抑制细胞中Bcl‑xL的蛋白表达水平。本方法通过抑制凋亡信号通路中的关键蛋白Bcl‑xL实现了对肿瘤细胞铁死亡信号的调控。

技术领域

本发明涉及一种提高肿瘤细胞放疗敏感性的方法，特别涉及一种基于铁死亡途径的提高肿瘤细胞放疗敏感性的方法。

背景技术

长期以来，人们普遍认为凋亡是治疗恶性肿瘤的关键靶点。在临床应用研究中，也是基于caspase依赖的凋亡途径去寻找抗肿瘤的新方法。作为凋亡的核心调控因子，Bcl-2家族中抗凋亡蛋白(Bcl-2、Bcl-xL、Bcl-w、Mcl-1等)和促凋亡蛋白(Bak、Bax、Bok、Puma等)之间的相互作用决定了细胞最终是否走向凋亡，因此Bcl-2家族分子常被作为肿瘤治疗的靶标，靶向Bcl-2设计合成的抗肿瘤药物Venetoclax已被美国药物管理局批准使用。但是肿瘤细胞异常的凋亡途径使得药物的临床使用效果并不理想。众多研究证实铁死亡作为一种新的程序性细胞死亡形式，其不同于凋亡的调控机制能够克服肿瘤细胞的耐药性，因此被认为是肿瘤治疗的新靶点。

铁死亡是2012年被定义的一种新型程序性细胞死亡方式，由细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4失活、脂质过氧化物累积而诱发。作为一种可调控的细胞死亡方式，铁死亡与肿瘤的发生发展密切相关，不断有研究发现铁死亡能够调控肿瘤细胞的放/化疗敏感性和耐药性。例如，诱发铁死亡能够增加肺癌细胞对顺铂的敏感性，并且能克服卵巢癌细胞对多西他赛的耐药性；此外，体内外实验均证实铁死亡能够增加肿瘤细胞及异种移植瘤的辐射敏感性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高肿瘤细胞放疗敏感性的方法。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种提高肿瘤细胞放疗敏感性的方法，通过促进肿瘤细胞铁死亡实现，具体包括通过基因敲除、基因敲低或小干扰RNA技术抑制细胞中Bcl-xL的蛋白表达水平。

优选的技术方案为：抑制细胞中Bcl-xL的蛋白表达水平包括使用Bcl-xL抑制剂实现。

优选的技术方案为：所述Bcl-xL抑制剂为APG-1252。

优选的技术方案为：小干扰RNA序列包括：NC：正向序列：5’-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3’；

反向序列：5’-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3’；

si-Bcl-xL-1：正向序列：5’-GGAACUCUAUGGGAACAAUTT-3’；

反向序列：5’-AUUGUUCCCAUAGAGUUCCAC-3’；

si-Bcl-xL-2：正向序列：5’-CAGGGACAGCAUAUCAGAGTT-3’；

反向序列：5’-CUCUGAUAUGCUGUCCCUGTT-3’。

由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：

本发明的Bcl-xL促进了ACSL4、LPCAT3和PEBP1的表达，增加了细胞中脂质过氧化物的积累；与此同时，Bcl-xL蛋白的缺失增加了GPX4与Hsp90和LAMP2A的相互作用，从而促进GPX4的溶酶体降解过程，使细胞中脂质过氧化物无法及时清除，最终诱发铁死亡。

附图说明

附图1为各缺陷型细胞系中相应蛋白表达情况。

附图2为Bcl-2家族蛋白对erastin诱导的铁死亡的响应情况(erastin(2μM)处理24h后，各组细胞存活情况的明场图)。