[发明专利]一种中生菌素F组分的工业生产方法

说明书

本发明提供一种中生菌素F组分的工业生产方法，包括如下步骤：步骤一、配制生产试管斜面培养基，并在斜面上接入链霉菌，进行培养，得到链霉菌试管菌苔悬液；步骤二、配制菌种发酵的种子培养基，并接入步骤一所得的链霉菌试管菌苔悬液，得到种子培养液；步骤三、配制发酵罐培养基，接入步骤二所得的种子培养液，得到发酵液；步骤四、将步骤三所得的发酵液经过过滤、离子交换、洗脱、浓缩、脱色、降温、干燥后，得到中生菌素F组分母药。本发明产物集中，能得到纯度较高的中生菌素F组分母药，较目前市售产品纯度明显提高；本发明方法制得的高含量中生菌素F组分母药在农药制剂加工中用途更为广泛，便于实现高容量制剂的开发和系列化开发。

技术领域

本发明涉及农药技术领域，具体涉及一种中生菌素F组分的工业生产方法。

背景技术

中生菌素（zhongshengmycin）又名农抗751菌素、链丝菌素，属N-糖苷类抗生素。根据文献报道，浅灰色链霉菌海南变种（Streptomyces lavendulae var heinanensisn.var）和秦岭链霉菌（Streptomyces qinlingnensis sp. nov）等多个链霉菌均能产生中生菌素。中生菌素抗菌谱广，能抗革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、分枝杆菌、酵母菌及丝状真菌等，对昆虫也有一定的杀灭作用。其杀菌机理是能够抑制polyU引导的多肽合成，并能导致蛋白翻译中的错读，使细菌不能合成蛋白质而死亡。中生菌素在农业上偏重于水稻白叶枯、黄瓜细菌性角斑病、白菜软腐病、杆菌溃疡病等细菌性病害，也可用于苹果轮纹病、黄瓜霜霉病、灰霉病、白粉病和番茄晚疫病等真菌性病害的防治。中生菌素有多个有效组分，其中中生菌素F组分是中生菌素中具有较高农药利用价值的组分之一。F组分结构如下（n=1）：

由于具有显著且直接杀菌作用，产生中生菌素的链霉菌在自然界比较容易被发现并分离得到。申请人在长期的野外菌种采集分离中多次得到产生中生菌素的菌株。2003年从蒲城土壤中分离得到一株放线菌，公司菌株编号18/46#，经形态、生理生化、细胞壁特征及分子生物学等特征判断为一株链霉菌。产物分离鉴定发现抑菌成分以中生菌素C、D、F组分为主，未发现报道的中生菌素A和X组分，且B、E组分含量低。目前该菌种保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，登记入册编号CGMCCNo.22065，公司保藏编号MKL1。随后申请人菌种中心进行了长期持续不断的单一紫外诱变筛选得95#链霉菌，并开展了培养基和培养条件优化，液体发酵，产物分离鉴定，活性测试等方面的研究。

目前，现有技术中尚没有中生菌素F组分的工业生产方法，因此，需要提供一种中生菌素F组分的工业生产方法。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种中生菌素F组分的工业生产方法，该方法可制备60-80%的中生菌素F组分母药，产品含量远高于目前农业部登记的12%中生菌素母药，溶解于水，不溶物小于0.2%，填补了高纯度中生菌素母药的空白，为混配制剂和含量高于12%农药产品生产开发提供了原料药。

为达到上述技术效果，本发明中生菌素F组分的工业生产方法采用如下技术方案：

一种中生菌素F组分的工业生产方法，包括如下步骤：

步骤一、配制生产试管斜面培养基，并在斜面上接入链霉菌，进行培养，得到链霉菌试管菌苔悬液；

步骤二、配制菌种发酵的种子培养基，并接入步骤一所得的链霉菌试管菌苔悬液，得到种子培养液；

步骤三、配制发酵罐培养基，接入步骤二所得的种子培养液，得到发酵液；

步骤四、将步骤三所得的发酵液经过过滤、离子交换、洗脱、浓缩、脱色、降温、干燥后，得到中生菌素F组分母药。

进一步的，所述步骤一中，所述生产试管斜面培养基采用玉米粉或者玉米淀粉作为碳源，用量3-7%；采用尿素作为氮源，用量1-3%；氯化钠，用量0.1-0.2%；氯化镁，用量0.1-0.2%；采用磷酸二氢钾作为磷源，用量0.2-0.4%；琼脂用量20g/L；用2mol/L盐酸或2mol/L氢氧化钠调pH值为7.0-7.4；用自来水补足。