[发明专利]具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针及其合成方法与应用、以及含有其的试剂盒

权利要求书

1.一种具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针，所述分子探针具有式Ⅰ所示的结构式：

2.一种具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针的合成，其特征在于：包括以下步骤：

(1)将化合物TPC溶解于二氯甲烷，加入乙二酰氯和DMF，反应结束后浓缩干燥，然后再溶解于二氯甲烷，加入苯酚、4-二甲氨基吡啶和三乙胺至反应结束，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，萃取后干燥浓缩，最后层析纯化，得式Ⅱ所示中间物：

(2)式Ⅱ中间物与Lawesson试剂、对二甲苯反应至结束，浓缩后层析纯化得到式Ⅰ所示目标分子探针：

3.如权利要求2所述的具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针的合成，其特征在于：所述步骤(1)中乙二酰氯和DMF的加入方式为0-5℃搅拌加入，然后在室温下继续搅拌至反应结束。

4.如权利要求2所述的具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针的合成，其特征在于：所述步骤(1)中1mmol TPC加入5-10mL二氯甲烷、0.1mL DMF，加入的乙二酰氯与TPC量的比为1.2:1；反应结束且干燥后再次溶解时1mmol TPC对应的产物中加入的二氯甲烷为2-3mL，苯酚为1-1.2mmol，4-二甲氨基吡啶为0.1-0.5mmol，三乙胺为3-4mmol。

5.如权利要求2所述的具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针的合成，其特征在于：所述步骤(1)中萃取时先用DCM或乙酸乙酯萃取，再用饱和氯化钠溶液萃取有机层。

6.如权利要求2所述的具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针的合成，其特征在于：所述步骤(2)中反应时在140℃惰性气体保护下搅拌反应至结束。

7.如权利要求2所述的具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针的合成，其特征在于：所述步骤(2)中1mmol式Ⅱ化合物中加入1.4-1.5mmol Lawesson试剂，1.5-2mL对二甲苯。

8.一种权利要求1所述的具有强特异性的半胱氨酸荧光分子探针的应用：其特征在于，所述荧光分子探针在半胱氨酸检测试剂盒中的应用。

9.一种半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求1所述的荧光分子探针，以及半胱氨酸检测组合物。

10.如权利要求9所述的半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：半胱氨酸检测组合物包括半胱氨酸标准品和溶剂，其中溶剂为PBS缓冲液和乙腈的混合溶液。