[发明专利]一种细胞培养方法及细胞培养容器

说明书

本发明公开了一种细胞培养方法，先将一次性容器本体载入微环境中，往一次性容器本体中加入细胞培养液，随培养时间的增加，逐次往一次性容器本体中加入补充液，一次性容器本体具有至少两个不同面积的内侧面，不同面积的内侧面形成相应个用于培养不同体积细胞溶液的培养面，细胞溶液先承载在小面积培养面上进行培养，随着细胞溶液体积增加，使细胞溶液承载在大面积培养面上进行培养。还公开了一种细胞培养容器，包括一次性容器本体，一次性容器本体有至少两个不同面积的内侧面，不同面积内侧面形成相应个用于培养不同体积细胞溶液的培养面。本细胞培养方法及细胞培养容器能满足积细胞溶液培养需求，提高细胞培养效果，易实现自动化生产，生产效率高。

技术领域

本发明涉及食品、药品、生命科学技术领域，尤其涉及一种细胞培养方法及细胞培养容器。

背景技术

细胞培养泛指所有体外培养，其含义是指从动物活体体内取出组织，置于模拟体内生理环境等特定的体内条件下，进行孵育培养，使之生存并生长。常用的细胞培养袋由于具有气体交换面积大，有利于细胞的培养，可以获得更多高质量的细胞，并且可以直接进行显微观察、监视细胞培养过程等多种操作，保证全程无菌，操作便捷等优点，已经得到了广泛的使用，如图10所示，在细胞培养的过程中，较少细胞溶液作为细胞培养的初始量平铺在较大体积的细胞培养容器内会造成细胞溶液较快的蒸发，会导致培养基渗透压过高，导致细胞皱缩，甚至引起细胞功能紊乱，最终引起细胞凋亡；而较多细胞溶液作为细胞培养的初始量会带来细胞密度过低，扩增速度慢的状况，在体外，细胞的对数增殖需要细胞之间的相互作用，当细胞密度较低时，细胞增殖速度明显降低。另外，较多细胞溶液作为细胞培养的初始量不但带来了成本的浪费，而且也要求从病人体内采集更多的血液，也是不可取的。

专利号201822257139.0一种新型细胞培养袋，通过在培养袋中间设计密封槽和密封条，配合培养袋上的排液口，可实现培养袋中培养液一半的定量抽取。

专利号201510906678.0立体结构细胞培养袋，该发明提出了一种立体结构的细胞培养袋，并集成试剂接头、传感器、取样袋，相对于扁平的培养袋，更有效的利用了封闭的培养空间。

专利号202020480642.7，可变体积细胞培养袋，该发明提出了一种细胞培养袋，通过袋体上的分隔夹，实现培养袋容积的可调，以满足在较少细胞溶液作为细胞培养初始量的培养需求，同时满足细胞培养过程中PH与DO的采集监控。

专利号202110782370.5，一种大容量悬浮细胞培养瓶，该发明通过在培养瓶上部和下部安装透气膜，以增加培养过程中的透气量，提升细胞培养效果。

以上专利在解决细胞培养的过程中提出了一部分解决方案，但是存在以下不足：难以满足体积不断增大的培养需求；细胞培养效果不佳；难以实现自动化生产；生产效率低。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种能够满足体积不断增大的细胞溶液的培养需求，提高细胞培养效果，易实现自动化生产，生产效率高的细胞培养方法及细胞培养容器。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

一种细胞培养方法，先将洁净无菌的一次性容器本体载入用于细胞培养的微环境中，往一次性容器本体中加入细胞培养所需的细胞培养液，随着培养时间的增加，逐次往一次性容器本体中加入细胞培养所需的补充液，所述一次性容器本体具有至少两个不同面积的内侧面，所述不同面积的内侧面形成相应个用于培养不同体积细胞溶液的培养面，细胞溶液先承载在小面积的培养面上进行培养，随着细胞溶液体积的增加，转动一次性容器本体使细胞溶液承载在大面积的培养面上进行培养。

细胞培养液包括细胞液、培养液等细胞培养时所需的液体；补充液包括培养基等用于细胞生长繁殖的营养物质；细胞溶液也称为细胞悬液；

作为上述技术方案的进一步改进：