[发明专利]一种用于多种类型临床样本的病原微生物核酸保存液及其应用在审
申请号: | 202210740049.5 | 申请日: | 2022-06-28 |
公开(公告)号: | CN115141875A | 公开(公告)日: | 2022-10-04 |
发明(设计)人: | 雷春燕;尹晗琪;孙诗园 | 申请(专利权)人: | 广州盘古医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12N15/10 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 林德强 |
地址: | 510320 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 多种 类型 临床 样本 病原微生物 核酸 保存 及其 应用 | ||
1.一种样本保存液,包括以下成分:硫代氰酸盐、缓冲液、络合剂、表面活性剂、防腐剂、无机盐、蛋白物质和DNA稳定剂。
2.根据权利要求1所述的样本保存液,其特征在于,所述样本保存液包括以下成分:硫代氰酸盐1~10M、缓冲液50~300mM、络合剂200~400mM、表面活性剂5v/v%~30v/v%、防腐剂0.01v/v%-0.1v/v%、无机盐50~250mM、蛋白物质0.05v/v%~0.3v/v%、DNA稳定剂1v/v%~10v/v%。
3.根据权利要求2所述的样本保存液,其特征在于,所述硫代氰酸盐为硫氰酸胍、硫氰酸钠、硫氰酸钾中的一种或多种;所述络合剂优选为EDTA、EDTA-2Na、DTPA、NTA中的一种或多种;所述无机盐优选为氯化钠、氯化铵、硫酸钠、硫酸铵、氯化钾、碳酸钾、磷酸铵、氯化锂、乙酸钠、碳酸锂、高氯酸钠、碘化钠中的一种或多种。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的样本保存液,其特征在于,所述缓冲液为三氨基甲烷盐酸、三羟基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、乙磺酸钠、乙酸钠、柠檬酸、邻苯二甲酸氢钾、硼酸、磷酸二氢钾、碳酸二氢钠、碳酸钠、碳酸氢铵、二乙醇胺、丙磺酸、柠檬酸钠、磷酸二氢钠、乙酸铵、亮氨酸、N,N-二羟乙基甘氨酸、3-(环己胺)-1-丙磺酸、3-吗啉丙磺酸、酒石酸钠、酒石酸中的一种或多种;所述表面活性剂优选为非离子性表面活性剂和阴离子性表面活性剂中的任一种或多种;所述防腐剂优选为叠氮钠、氯霉素、庆大霉素、ProClin 300、硫酸新霉素中的任一种或多种。
5.根据权利要求1~3中任一项所述的样本保存液,其特征在于,所述样本保存液的pH值为5~9。
6.权利要求1~5中任一项所述的样本保存液的制备方法,包括以下步骤:将硫代氰酸盐、缓冲液、络合剂、表面活性剂、防腐剂、无机盐、蛋白物质和DNA稳定剂混合,调节pH,即得到样本保存液。
7.一种核酸提取试剂,包括权利要求1~5中任一项所述的样本保存液。
8.一种试剂盒,包括权利要求1~5中任一项所述的样本保存液。
9.权利要求1~5任一项所述的样本保存液、权利要求7所述的核酸提取试剂或权利要求8所述的试剂盒在(1)~(3)中任一项中的应用;
(1)微生物样本保存;
(2)微生物核酸提取;
(3)微生物检测。
10.一种微生物样本保存方法,其特征在于,所述方法采用权利要求1~5中任一项所述的样本保存液或权利要求7所述的试剂盒将微生物样本进行保存。
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