[发明专利]一株多重耐药肯塔基沙门菌烈性噬菌体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一株多重耐药肯塔基沙门菌烈性噬菌体及其制备方法和应用。该噬菌体名称为沙门氏菌噬菌体(Salmonella phage)MDASK，保藏号为GDMCC NO：62376‑B1，于2022年4月12日保存于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼的广东省微生物菌种保藏中心。该噬菌体可以以多重耐药肯塔基沙门菌(Salmonella sp.Kentucky)10A20为宿主菌分离得到，其具有较高的温度耐受性和较宽的酸碱耐受范围，效价高，潜伏期较短，且具有强裂解效用，可作为抗菌剂用于降低畜禽生产链中肯塔基沙门菌污染。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，特别涉及一株多重耐药肯塔基沙门菌烈性噬菌体及其制备方法和应用。

背景技术

沙门菌属于肠道致病菌，其感染人和动物后可引起伤寒、急性胃肠炎以及败血症等疾病，是全球范围内引起食物中毒的常见病原菌之一；也是导致人类死亡的第三大致病菌。近年来，肯塔基沙门菌(Salmonella Kentucky)已成为引起食源性疾病常见的沙门菌血清型之一。预防和治疗沙门菌感染的主要手段仍是抗生素，但由于抗生素长期和不合理的使用，使得沙门菌产生了广泛的耐药性。据报道，沙门菌属的多重耐药率已从20世纪90年代的20％增加到了本世纪初的70％，且耐药性可通过食物链或环境在人与食品、人与人或人畜之间传递。这对食品性动物生产和公共卫生安全造成极大的危害，同时，也对全球的食品安全和人类健康产生了巨大的威胁。

在导致沙门菌中毒的食品中，畜禽产品(如肉、蛋、奶)占90％。鸡肉是世界范围内主要的动物性食品之一，且肉鸡在养殖、屠宰，以及鸡肉贮藏、加工和销售过程中极易受到沙门菌的污染。有研究对鸡屠宰场主要加工环节中沙门菌的污染情况进行了监测，结果表明在屠宰的四个环节(浸烫、预冷、分割和运输)中，沙门菌的检出率呈现先下降后升高的趋势。

为了降低畜禽生产链中沙门菌的污染，人们常采取冲淋、伽马辐射、使用噬菌体制剂、控制啮齿动物和昆虫、控制人员和设备的移动和使用有机酸制剂、微生态制剂、专用消毒剂等一系列的措施。其中，噬菌体制剂是近些年人们较为关注的话题。噬菌体是感染细菌、真菌等微生物的病毒，发现之初便用于治疗细菌感染。与传统抗生素相比，噬菌体具有分布广、易筛选、高度的宿主专一性、增殖能力强、安全性高、研发成本低等优势。随着多重耐药菌的广泛流行，噬菌体治疗细菌感染重新引起了人们的重视，且因其高效特异识别并裂解宿主菌的特性被认为是最具潜力的抗生素替代品之一。

Mahmoud等人(Mahmoud M,Askora A,Barakat AB,et al.Isolation andcharacterization of polyvalent bacteriophages infecting multi drug resistantSalmonella serovars isolated from broilers in Egypt[J].International Journalof Food Microbiology,2018,266:8-13.)分离出了三株多价噬菌体，并命名为Salmacey1、Salmacey2和Salmacey3，它们都能裂解4种不同血清型的沙门菌，同时还能裂解柠檬酸杆菌。其中Salmacey1和Salmacey2属于长尾噬菌体科，潜伏期分别为35min和40min，爆发期分别为85min和100min，裂解量分别为80PFU/cell和90PFU/cell。而Salmacey3属于肌尾噬菌体科，潜伏期为60min，爆发期为80min，裂解量为110PFU/cell。还有一株肯塔基沙门噬菌体(未命名)属于长尾噬菌体科，潜伏期为10min，爆发期为15min，裂解量为100PFU/cell。这些肯塔基沙门噬菌体均存在潜伏期长、裂解量低且感染复数较大的问题。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一株多重耐药肯塔基沙门菌烈性噬菌体。

本发明的另一目的在于提供一株用于制备所述噬菌体的多重耐药肯塔基沙门菌。

本发明的再一目的在于提供所述多重耐药肯塔基沙门菌烈性噬菌体的应用。