[发明专利]地龙溶栓活性标志肽及其在地龙溶栓活性测定中的应用在审
| 申请号： | 202210742607.1 | 申请日： | 2022-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN115477689A | 公开（公告）日： | 2022-12-16 |
| 发明（设计）人： | 季申;张静娴;胡青;冯亭亭;毛秀红;孙健;于泓;冯睿 | 申请（专利权）人： | 上海市食品药品检验研究院 |
| 主分类号： | C07K7/08 | 分类号： | C07K7/08;C07K7/06;G01N33/68;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人： | 郎祺 |
| 地址： | 200120 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 地龙 活性 标志 及其 测定 中的 应用 | ||
1.一组地龙溶栓活性标志肽，其特征在于，包括
参环毛蚓溶栓活性标志肽1～11，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:11所示；
沪地龙溶栓活性标志肽3、11，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:11所示。
2.根据权利要求1所述的地龙溶栓活性标志肽，其特征在于，所述沪地龙为通俗环毛蚓和威廉环毛蚓。
3.根据权利要求1所述的地龙溶栓活性标志肽，其特征在于，所述溶栓活性标志肽1～11的质谱条件为：
4.权利要求1-3任一项所述地龙溶栓活性标志肽在地龙溶栓活性测定中的应用。
5.一种基于权利要求1-3任一项所述地龙溶栓活性标志肽的地龙溶栓活性测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，对待测样品进行处理，得到待测多肽混合液；
步骤二，采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱仪检测所述待测多肽混合液，得到待测样品的溶栓活性标志肽质谱图。
6.根据权利要求5所述的地龙溶栓活性测定方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-三重四级杆质谱仪检测的色谱条件为：
分析柱：CORTECS C18色谱柱，2.7μm 2.1×50mm；
进样量：1μl；
流速：0.2ml/min；
流动相：流动相A为0.1％甲酸-水溶液，流动相B为乙腈，
梯度洗脱：0～10min，2～35％B；30～32min，35～90％B。
7.根据权利要求5所述的地龙溶栓活性测定方法，其特征在于，所述超高效液相色谱-三重四级杆质谱仪检测的质谱条件为：喷雾电压为4000V，气体温度270℃，流速16L/min，Nebulizer 45psi，采用MRM模式。
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