[发明专利]表达乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的工程化微生物及提高PHA中3-羟基己酸比例的方法有效
| 申请号： | 202210751059.9 | 申请日： | 2022-04-06 |
| 公开（公告）号： | CN115261347B | 公开（公告）日： | 2023-07-25 |
| 发明（设计）人： | 尹进;王禺;李佳佳;侯杰;邹亮;陈子贤 | 申请（专利权）人： | 深圳蓝晶生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12N9/10;C12N15/74;C12N15/90;C12N1/21;C12P7/625;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 商秀玲 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山区西丽街道松*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 乙酰 辅酶 还原酶 变体 工程 微生物 提高 pha 羟基 己酸 比例 方法 | ||
1.乙酰乙酰辅酶A还原酶变体或其编码基因在提高工程化罗氏真养菌以植物油为碳源生产PHA中3-羟基己酸的比例中的应用，其特征在于，所述乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示；
所述工程化罗氏真养菌表达能够合成聚(3-羟基丁酸酯-共-3-羟基己酸酯)的PHA聚合酶变体。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述应用通过以下任一种或多种方式实现：
(1)向罗氏真养菌中导入包含所述乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的编码基因的质粒；
(2)在罗氏真养菌的基因组中插入一个或多个拷贝的所述乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的编码基因。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述工程化罗氏真养菌还包含以下修饰：(R)-烯酰辅酶A水合酶的表达和/或酶活性增强。
5.一种工程化罗氏真养菌，其特征在于，所述工程化罗氏真养菌表达乙酰乙酰辅酶A还原酶变体，所述乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示；
所述工程化罗氏真养菌还表达能够合成聚(3-羟基丁酸酯-共-3-羟基己酸酯)的PHA聚合酶变体。
6.根据权利要求5所述的工程化罗氏真养菌，其特征在于，所述表达通过以下任一种或多种方式实现：
(1)导入包含所述乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的编码基因的质粒；
(2)在基因组中插入一个或多个拷贝的所述乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的编码基因。
7.根据权利要求6所述的工程化罗氏真养菌，其特征在于，所述乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的编码基因如SEQ ID NO.1所示。
8.根据权利要求5～7任一项所述的工程化罗氏真养菌，其特征在于，所述工程化罗氏真养菌还包含以下修饰：(R)-烯酰辅酶A水合酶的表达和/或酶活性增强。
9.根据权利要求5～7任一项所述的工程化罗氏真养菌，其特征在于，所述能够合成聚(3-羟基丁酸酯-共-3-羟基己酸酯)的PHA聚合酶变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示。
10.权利要求5～9任一项所述的工程化罗氏真养菌的构建方法，其特征在于，所述方法包括修饰罗氏真养菌以表达所述乙酰乙酰辅酶A还原酶变体的步骤。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于深圳蓝晶生物科技有限公司，未经深圳蓝晶生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202210751059.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
