[发明专利]用于治疗高赖氨酸血症的组合物及应用

权利要求书

1.用于治疗高赖氨酸血症的组合物，其特征在于，活性成分为代谢赖氨酸的工程菌I和II；

其中，工程菌I是以大肠杆菌为出发菌株，通过敲除ldcC1和ldcC2基因，并在大肠杆菌中表达来自酿酒酵母菌BY4741的LKR和SDR基因构建得到的；

优选地，所述大肠杆菌为Nissle 1917；

ldcC1基因为：

a1)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；

b1)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

c1)在严格条件下与SEQ ID NO:1所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％sds的0.1×sspe或含0.1％sds的0.1×ssc溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或

d1)与a1)、b1)或c1)的核苷酸序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

ldcC2基因为：

a2)SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；

b2)SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

c2)在严格条件下与SEQ ID NO:2所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或

d2)与a2)、b2)或c2)的核苷酸序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

LKR基因为：

a3)SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列；

b3)SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

c3)在严格条件下与SEQ ID NO:3所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或

d3)与a3)、b3)或c3)的核苷酸序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

SDR基因为：

a4)SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列；

b4)SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

c4)在严格条件下与SEQ ID NO:4所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或

d4)与a4)、b4)或c4)的核苷酸序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

工程菌II是以大肠杆菌为出发菌株，通过敲除ldcC1和ldcC2基因，并在大肠杆菌中表达来自酿酒酵母菌BY4741的lys5和lys2基因构建得到的；

优选地，所述大肠杆菌为Nissle 1917；

lys5基因为：

a5)SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列；

b5)SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

c5)在严格条件下与SEQ ID NO:5所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或

d5)与a5)、b5)或c5)的核苷酸序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

lys2基因为：

a6)SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列；

b6)SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；

c6)在严格条件下与SEQ ID NO:6所示序列杂交且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列，所述严格条件为在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜；或

d6)与a6)、b6)或c6)的核苷酸序列具有90％以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。