[发明专利]受激拉曼散射技术在尿酸盐晶体体内外成像中的应用

说明书

本发明提供了受激拉曼散射技术在尿酸盐晶体体内外成像中的应用；通过论证SRS的可行性，在组织和细胞中，基于MSU指纹拉曼峰，成像MSU在组织细胞内的沉积；本发明通过SRS连续监测MSU晶体成核、生长以及与周围组织细胞的相互作用，为了解MSU与周围组织之间的基本相互作用提供了理想的分析工具，并为快速诊断痛风和其他基于MSU的疾病提供了潜力。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及受激拉曼散射技术在尿酸盐晶体体内外成像中的应用。

背景技术

痛风是一种全身性疾病，目前通风的发病率和疾病负担均日益增加。痛风的主要病理机制是血清中尿酸浓度升高(超过6.8mg/dL)以及关节腔内沉积了过度饱和的尿酸盐(MSU)晶体，且MSU晶体会沉积在软骨、滑膜或肌腱表面。

慢性痛风的一线治疗策略是通过药物或手术减少MSU的沉积，快速准确的原位检测MSU在痛风的诊断和治疗中都是至关重要的。化学特异性检测在面对复杂情况时尤其重要。然而，无论是金标准组织学检查，还是补偿偏光显微镜(CPLM)都不能提供MSU晶体足够的化学特异性，CPLM和病理诊断的假阴性率较高且处理组织较耗时。

晶体鉴定主要在滑膜液中进行，但痛风人群可能经历非典型疾病过程；即许多患者在首次发病前关节表面已经有MSU晶体沉积，且相当一部分痛风患者往往等到出现软骨损伤、韧带损伤甚至骨折的首发症状时才被诊断出来；此外，在进行病理检查之前，痛风关节炎可能会与疑似感染、肿瘤或类风湿关节炎形成混淆。

因此，能够快速、特异性识别新鲜组织中MSU的方法是优化手术策略的迫切需要。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供受激拉曼散射(SRS)技术在尿酸盐晶体体内外成像中的应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

提供受激拉曼散射技术在尿酸盐晶体体内外成像中的应用。

优选地，所述尿酸盐晶体的体内成像包括：尿酸盐晶体成核、生长以及与周围组织细胞相互作用的成像。

优选地，所述尿酸盐晶体的体外成像包括：尿酸盐晶体的沉积的成像。

优选地，所述受激拉曼散射技术所采用的受激拉曼散射系统以光学参量振荡器的双输出商用脉冲飞秒激光束作为光源，以基本1040nm激光器作为斯托克斯(Stokes)光束，以OPO可调谐激光作为泵浦光。

优选地，所述泵浦光的功率为70-90mW，所述斯托克斯光束的功率为150-170mW。

优选地，所述斯托克斯光束由10MHz的电光调制器进行强度调制，并通过二向色镜与泵浦光对准。

优选地，每个视场的大小为512×512像素，横向分辨率为～350nm，像素停留时间为2μs。

本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：

本发明通过论证SRS的可行性，在组织和细胞中，基于MSU指纹拉曼峰，成像MSU在组织细胞内的沉积；本发明通过SRS连续监测MSU晶体成核、生长以及与周围组织细胞的相互作用，为了解MSU与周围组织之间的基本相互作用提供了理想的分析工具，并为快速诊断痛风和其他基于MSU的疾病提供了潜力。

附图说明

图1为本发明的技术路线图；

图2为多色SRS对大鼠模型(注射后3天)新鲜组织假性痛风的鉴别和微晶体的早期检测；

图3为痛风性关节炎患者滑膜液中MSU的检测；

图4为慢性痛风组织的SRS、HE和免疫荧光评价；

图5为SRS、HE和免疫荧光的三组慢性痛风组织的定量分析；