[发明专利]一种优化环介导等温扩增反应的方法在审
| 申请号： | 202210761203.7 | 申请日： | 2022-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN115029420A | 公开（公告）日： | 2022-09-09 |
| 发明（设计）人： | 崔大祥;李雪玲;田静;仲禺俊;沈琦;李玥 | 申请（专利权）人： | 国纳纳米技术研究（河北）有限公司;上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/689;C12R1/42;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海东亚专利商标代理有限公司 31208 | 代理人： | 董梅 |
| 地址： | 051430 河北省石家庄市裕华区高*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 优化 环介导 等温 扩增 反应 方法 | ||
1.一种优化环介导等温扩增反应的方法，其特征在于，通过向环介导等温扩增反应体系中添加石蜡块同时避免使用甜菜碱来实现wsg txi 优化，包括如下步骤：
（1）在反应管底部加入反应混合物I；
（2）加入石蜡块，盖上管盖，60℃融化、冷却，其中，石蜡块的用量为：在25µL的核酸扩增反应体系中加入石蜡块融化后的体积为8µl；
（3）加入反应混合物II；
（4）进行等温扩增反应；
（5）核酸扩增产物检测：通过电泳检测、浊度检测或显色检测。
2.根据权利要求1所述的一种利优化环介导等温扩增反应的方法，其特征在于，所述的石蜡块的熔点为48-50℃。
3.根据权利要求1所述的一种利优化环介导等温扩增反应的方法，其特征在于，所述的反应混合物I包括dNTP、外引物F3和B3、内引物FIP和BIP、Bst DNA聚合酶、聚合酶缓冲液、Mg2+和/或MnCl2。
4.根据权利要求1所述的一种利优化环介导等温扩增反应的方法，其特征在于，所述的反应混合物II包括dNTP、外引物F3和B3、内引物FIP和BIP、Bst DNA聚合酶、聚合酶缓冲液、Mg2+和/或MnCl2。
5.根据权利要求1所述的一种优化环介导等温扩增反应的方法，其特征在于，所述的反应混合物不包括甜菜碱。
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