[发明专利]一种异源产虫草素的米曲霉工程菌及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 202210762642.X | 申请日： | 2022-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN116004697A | 公开（公告）日： | 2023-04-25 |
| 发明（设计）人： | 曾斌;王立 | 申请（专利权）人： | 深圳技术大学 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N1/15;C12N15/31;C12P19/40;C12R1/69 |
| 代理公司： | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) 44268 | 代理人： | 徐凯凯 |
| 地址： | 518118 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 异源产 虫草 曲霉 工程 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种异源产虫草素的米曲霉工程菌的构建方法，其特征在于，包括步骤：
以蛹虫草基因组中的CCM-04436基因为模板设计第一引物，根据所述第一引物从所述蛹虫草基因组中扩增得到CCM-04436克隆片段，所述CCM-04436克隆片段的核苷酸序列为SEQ ID NO.1，所述第一引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.2-3；
将所述CCM-04436克隆片段与载体pEX1同源重组，得到基因CCM-04436异源表达载体；
以蛹虫草基因组中的CCM-04437基因为模板设计第二引物，根据所述第二引物从所述蛹虫草基因组中扩增得到CCM-04437克隆片段，所述CCM-04437克隆片段的核苷酸序列为SEQ ID NO.4，所述第二引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.5-6；
将所述CCM-04437克隆片段与载体pEX2D同源重组，得到基因CCM-04437异源表达载体；
将所述基因CCM-04436异源表达载体和基因CCM-04437异源表达载体分别转化至米曲霉双缺陷型营养菌株中，构建得到异源产虫草素的米曲霉工程菌AO1和AO2，再以AO1为背景菌株转化基因CCM-04437异源表达载体得到同时转化两个基因的转化子AO12。
2.一种异源产虫草素的米曲霉工程菌，其特征在于，采用权利要求1所述异源产虫草素的米曲霉工程菌的构建方法制得。
3.一种异源产虫草素的米曲霉工程菌的应用，其特征在于，将权利要求1构建方法制得的异源产虫草素的米曲霉工程菌用于生产虫草素。
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