[发明专利]一种烟草种子内生拮抗菌及其应用

说明书

本发明涉及一种烟草种子内生拮抗菌DW15，保藏编号：CCTCC NO：M 2022820，分类命名为副黄假单胞菌Pseudomonas parafulva，保藏于中国典型培养物保藏中心。该菌株呈黄色圆形，表面湿润光滑，微隆起。本发明筛选的种子内生菌DW15对青枯雷尔氏菌的抑菌作用强，是对烟草青枯病具有良好效果的生防细菌，能产生较多的蛋白酶，以及较强的解磷和固氮能力。同时对烟草植株具有良好的促生效果，能显著提高烟苗生物量，可单用或复配使用，对烟草青枯病生物防治具有广阔的应用前景，对保护生态环境也有重要意义。

技术领域

本发明属于农业微生物防治技术领域，涉及一种烟草种子内生拮抗菌及其应用。

背景技术

青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种毁灭性的土传病害，其病原菌极具破坏性，可侵染超过200种植物，造成巨大的经济损失，诸如使番茄减产0-91％，马铃薯减产33-90％，烟草减产10-30％，香蕉减产80-100％，花生减产20％等。烟草青枯病(Tobacco bacterial wilt)是当前烟草生产中危害严重、防控困难的一种土传病害。烟草青枯病在中国西南烟区为害广泛，并有向高海拔冷凉地区迁移的趋势，是实际生产中亟待解决的植物病害。在我国，由于长期以来烟草连作、施肥和管理方式不当等因素，烟草连作障碍严重、烟草青枯病大面积爆发，严重降低各大烟区烟叶的产质量。

烟草青枯病防治面临着极大挑战。对于烟草青枯病的防治，目前主要有选育抗性品种、生物防治、化学防治等措施。由于化学防治存在危害人类健康和破坏生态平衡等问题，而生物防治具有对人畜安全、环境友好等优点，因此，近年来对土传病害烟草青枯病的生物防治越来越受到重视，用于防治烟草青枯病的生防细菌的研究较为广泛。

目前，对烟草青枯病的防治研究主要集中在诱抗化合物对烟草青枯病的防治效果和机制、青枯病与根际微生物的互作等方面，对植物内生菌与烟草青枯病互作关系的相关研究较少。植物与内生菌协同进化，根据内生菌的作用，将其分为三类：一是中性内生微生物，该类微生物对植物没有明显的有害或者有益作用；二是有益内生微生物，能够发挥保护植物免受病原体或食草生物的侵害、促进植物生长等有益作用；三是潜在病原内生微生物，产生不利于植物生长的物质。所以找到对烟草植株有益内生微生物是亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一株具有促生作用等多性能的烟草种子内生拮抗菌，还提供其可在农业产业化上的各种应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1.烟草种子内生拮抗菌，其特征在于，所述烟草种子内生拮抗菌为DW15，分类命名：副黄假单胞菌Pseudomonas parafulva，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：武汉，保藏日期：2022年6月7日，保藏编号：CCTCC NO：M 2022820。

进一步，烟草种子内生拮抗菌的菌株呈黄色圆形，表面湿润光滑，微隆起。

进一步，烟草种子内生拮抗菌的菌株能产生蛋白酶。

2、上述任一项所述烟草种子内生拮抗菌作为生物菌剂用于抑制和/或防治青枯病中的应用。

进一步，具有烟草种子内生拮抗菌作为生物菌剂用于抑制和/或防治青枯病中的应用中，生物菌剂中烟草种子内生拮抗菌的使用浓度为1×10⁶cfu/mL-1×10¹²cfu/mL。

进一步，具有烟草种子内生拮抗菌作为生物菌剂用于抑制和/或防治青枯病中的应用中，所述生物菌剂的制备方法为：将烟草种子内生拮抗菌DW15菌株活化后，挑取单菌落接种至LB液体培养基，30℃、180r/min培养至对数期，使用无菌水稀释至1×10⁶cfu/mL-1×10¹²cfu/mL对植株进行灌根处理。