[发明专利]一种对人源性CEA具有结合亲和力的多肽及其用途

说明书

本发明公开了一种对人源性CEA具有结合亲和力的多肽，首次提出了一种对人源性CEA具有结合亲和力的多肽；本发明还提供了该多肽在诊断检测中的应用，并作为靶向载体在药物或分子靶向试剂的诊断或治疗用途。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种对人源性CEA具有结合亲和力的多肽及其用途。

背景技术

胃癌是消化道的常见恶性癌症，目前仍然是当今世界上癌症性疾病导致死亡的主要病因。近年来，随着医学水平的不断提高，血清癌症标志物的定量检测已经成为了发现早期胃癌的重要手段，与普通胃镜或者是无痛胃镜等其他有创检查相比，其有安全、快速、经济、损伤小等优势。

血清癌症标志物包括癌胚抗原(CEA)，CEA的相对分子质量为180-200KDa，是CEA相关细胞粘附(CEACAM)超家族中的一种对人源性CEA具有结合亲和力的多肽及其用途糖蛋白，来源于机体内胚层上皮组织的糖蛋白，正常情况下人体血清CEA的含量极低。但是，据报导，胃癌患者CEA的阳性率为85.58％，由此可见CEA对胃癌诊断具有一定的辅助作用。一旦正常机体出现癌症症状时，CEA会失去极化分布后过度表达。另外，在磷脂酶作用下，细胞表面的CEA可以进入血清，导致血清CEA的增加。此外，血清CEA水平与大肠癌的分期有明确关系，越晚期的病变，CEA浓度越高。

CEA血清含量的检测目前已经被成熟的应用于恶性癌症的诊断和预后指标，并且癌症患者手术治疗后，目前常规术后复查CEA以检测癌症的发展情况。过度表达CEA的恶性癌症常见于原发性结肠癌、大肠癌、胰腺癌、胃癌、胆管癌、小细胞肺癌、乳腺癌、甲状腺髓样癌、食道癌、腺癌、泌尿系统的肿瘤等。CEA在癌细胞粘附，迁移和侵袭中起着重要作用。

目前，CEA已经成为免疫治疗的靶标。放射性标记的单克隆抗体已经被开发用于诊断和治疗CEA阳性癌症。尽管如此，单克隆抗体由于表现出缓慢的血液清除速率以及在肝脏的高摄取率对于其用作癌症靶向探针是并不是十分理想的。较小的抗体片段，如抗原结合片段(Fab)和单链可变片段的，特别是纳米抗体，由于它们的具有快速代谢和癌症的高摄取以及更好的药代动力学这些特点使得他们近年来被用作癌症靶向探针。

目前，对于某些恶性癌症而言，市场上已出现相应商品化的单克隆抗体，如来自于罗氏公司的利妥昔单抗和曲妥珠，这些抗体已经用于淋巴瘤以及乳腺癌的有效治疗。但是，单克隆抗体分子存在着明显的缺点：相对分子质量较大，结构复杂，并且在制备过程繁杂、价格十分昂贵，容易产生脱靶现象，而且具有较大的药物副作用。

affibody亲和体分子与抗体相比有着独特的优势，比如化学性质稳定、穿透性良好、可修饰性强、在血浆中易于清除等。因此，亲和体分子在临床诊断和分子靶向治疗中有着重要的作用。

因此，本领域对仍需继续以CEA为核心的亲和体分子筛选及其特性的研究。

发明内容

为有效对本发明的内容进行阐述，先对部分核心材料进行初步介绍：新型小分子材料例如非抗体亲和性蛋白affibody，具有化学性质稳定、分子质量小、亲和力高等特点。最原始的affibody亲和体分子来自于金黄色葡萄球菌蛋白A的免疫球蛋白结合区域B段(SPAZ)。之后研究人员将B段的第29位氨基酸甘氨酸突变为丙氨酸，增加了其结构的稳定性，从而称作为affibody Z结构域。金葡菌A蛋白Z结构域(简称为Zwt)由58个氨基酸组成，具有三个α螺旋结构，分子量约为7KDa。在第一、第二螺旋区域上有13个特定的氨基酸位点，分别位于Q9(谷氨酰胺)、Q10(谷氨酰胺)、N11(天冬酰胺)、F13(苯丙氨酸)、Y14(酪氨酸)、L17(亮氨酸)、H18(组氨酸)、E24(谷氨酸)、E25(谷氨酸)、R27(精氨酸)、N28(天冬酰胺)、Q32(谷氨酰胺)、K35(赖氨酸)。蛋白骨架序列不变的情况下，这13个氨基酸位点的突变不会影响整体结构。通过将结构域Z的α-螺旋受体的13个特定氨基酸行随机化设计，可以产生针对各种靶抗原的相应affibody分子。