[发明专利]一种D-半乳糖修饰的α-亚麻酸肝靶向纳米乳液及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种D‑半乳糖修饰的α‑亚麻酸肝靶向纳米乳液及其制备方法和应用，属于宠物抗肿瘤药物技术领域。通过以α‑亚麻酸为活性功能因子，D‑半乳糖为靶向配体，壳聚糖为桥接α‑亚麻酸和靶向配体D‑半乳糖的靶向增强因子，显著提升活性因子的生物利用度及作用效果。本发明制备的负载α‑亚麻酸的肝靶向纳米乳液属于食品级材料的范畴，具有无毒、可生物降解、生物相容性好的优点，在食品及医药领域具有广阔的应用前景。本发明制备的D‑半乳糖修饰的α‑亚麻酸肝靶向纳米乳液粒径为40‑80nm，具有易被体内细胞吸收的特性，显著增强吸收利用度，并允许大幅度提高活性组分负载量。

技术领域

本发明涉及宠物抗肿瘤药物技术领域，特别涉及一种D-半乳糖修饰的α-亚麻酸肝靶向纳米乳液及其制备方法和应用。

背景技术

近年来，肿损伤及肝肿瘤成为困扰宠物的一类肝部疾病，越来越多的犬猫肝部位出现损伤及肿瘤，并且种类也不尽相同，宠物犬猫肝肿瘤是犬猫易发生的十大肿瘤之一，极大地威胁宠物犬猫的生命健康。α-亚麻酸(ALA)具有降低血糖血压，预防心脑血管疾病，调节血脂，抗炎、促进损伤肝细胞的再生，抗肿瘤生长等生理功能。身体组织肿瘤受到ALA及其衍生物DHA的作用，从而抑制肿瘤的生长，使肿瘤不断地缩小。开发添加α-亚麻酸的动物功能性饲料具有很好的开发前景。但由于ALA具有三个不饱和双键，在储存和递送过程中极容易被氧化，因而影响其生物利用度。因此，将其负载到递送载体保护ALA，在储存和递送阶段减少氧化损伤，提高ALA的生物利用度和递送效率。为进一步实现活性成分在目标区域的有效释放，针对性治疗，提高利用率，可以采用受体特异性识别配体的靶向作用实现靶向作用，提高α-亚麻酸作用的目标性。

去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)是动物肝细胞表面过表达的受体，是定位于肝细胞表面的主要生物靶点，组成结构末端带有半乳糖或乙酰半乳糖胺残基的糖蛋白容易被特异性识别，在良好的生理条件下具有高亲和力和高稳定性，糖蛋白受体的主要功能是通过糖蛋白的识别、结合和内吞作用来维持血清糖蛋白稳态，通过受体介导的内吞作用内化后，在核内体的酸性环境中解离并最终降解。

半乳糖化靶向递送系统是近年来靶向给药系统研究的热点。以半乳糖为端基的药物及药物载体具有去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)介导的肝实质细胞靶向性，ASGPR能特异性识别末端带有半乳糖残基或乙酰半乳糖残基的寡糖或寡糖蛋白，并与之相结合。如何利用ASGPR配基修饰一些外源性功能物质，设计合成一系列基于ASGPR受体介导的靶向给药系统；以实现负载物高效递送到目标细胞，有效作用治疗，从而减少对健康组织的毒副作用，制备出具有高效力的结合物来进行肿瘤的靶向治疗，是本领域亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种D-半乳糖修饰的α-亚麻酸肝靶向纳米乳液及其制备方法和应用。通过以α-亚麻酸为活性功能因子，D-半乳糖为靶向配体，壳聚糖为桥接α-亚麻酸和靶向配体D-半乳糖的靶向增强因子，显著提升活性因子的生物利用度及作用效果。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明技术方案之一：提供一种D-半乳糖修饰的α-亚麻酸肝靶向纳米乳液的制备方法，包括以下步骤：

(1)内水相的制备：将D-半乳糖和壳聚糖溶于水，得到内水相；

(2)混合油相的制备：将α-亚麻酸与油相混合，得到混合油相；

(3)W/O纳米乳液的制备：将所述内水相、表面活性剂和助表面活性剂混合均匀，加入所述混合油相，乳化，制得W/O纳米乳液；

(4)W/O/W纳米乳液的制备：将所述W/O纳米乳液、表面活性剂和助表面活性剂混合均匀，加入水，制得W/O/W纳米乳液，即为D-半乳糖修饰的α-亚麻酸肝靶向纳米乳液。

优选地，步骤(1)中所述D-半乳糖、壳聚糖和水的质量比为(1～5):(1～3):(500～1000)；所述D-半乳糖、壳聚糖和水的质量比最优选为1:1:300。