[发明专利]一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法

权利要求书

1.一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：以蔗糖为底物，在右旋糖酐蔗糖酶发酵液的存在下先合成高分子量的右旋糖酐，再加入右旋糖酐酶发酵液，降解高分子量的右旋糖酐得到分子量5000～7500Da的右旋糖酐；

步骤2：通过离心5000转5分钟，除去菌种，离心液通过大孔树脂柱得到低分子右旋糖酐，将得到的低分子量的右旋糖酐用纯水加热到35-75℃溶解获得质量浓度20％的右旋糖酐溶液，以过氧化物混合液作为氧化剂，制备获得氧化型右旋糖酐；

步骤3：在搅拌下向步骤2获得的氧化型右旋糖酐溶液中同时滴加质量浓度为40-50％的三氯化铁溶液以及质量浓度为20％的磷酸钠溶液控制pH值，滴加过程中控制体系的pH在3-5，滴加时间为4h，络合温度为40℃，获得右旋糖酐铁，随后用氢氧化钠调节体系的pH值至10.5-11.5，升温至75℃反应5h以上获得固化右旋糖酐铁；

步骤4：将步骤3获得的反应液冷却至室温，然后用20000-80000Da的超滤膜除去未反应的右旋糖酐和低分子量的右旋糖酐铁，然后再用100-500Da的超滤膜除去其中的盐离子，喷雾干燥后获得纯化后的右旋糖酐铁。

2.根据权利要求1所述的一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，其特征在于，所述步骤1的反应体系中，蔗糖的浓度为120-200mg/mL，右旋糖酐蔗糖酶发酵液中右旋糖酐蔗糖酶的浓度为0.2IU/mL，右旋糖酐酶发酵液中右旋糖酐酶的浓度为0.2IU/mL，反应温度为16-37℃，反应时间为48-72小时。

3.根据权利要求2所述的一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，其特征在于，所述步骤1的反应置于一个特制发酵罐中，发酵罐内设置圆筒状陶瓷半透膜，陶瓷半透膜内置有发酵体系且设置有搅拌器，陶瓷半透膜与发酵罐壁之间的环形空腔内置有纯水，反应15h内为发酵初期，保持陶瓷半透膜内外液体的静压比为5:1，避免反应体系的蔗糖浓度及粘度过低；发酵二期为15h-20h，匀速降低陶瓷半透膜内反应体系的静压，直至发酵20h时，内外静压比为3:1，菌种发育进入对数期，反应体系粘度及产物浓度逐渐增加；；发酵三期为20-30h，匀速降低陶瓷半透膜内反应体系的静压，直至发酵30h时，内外静压比为1:1，此时为反应体系粘度及产物浓度暴增时期，维持低压使外侧水得以渗透至反应体系中，降低体系浓度；发酵四期为30-40h，反应维持平稳，菌种发育至最高峰，粘度达到最高峰，适当增加陶瓷半透膜外侧静压，使至发酵30h时，内外静压比为1:2；发酵40h-结束前，降解反应占主导，粘度逐渐下降，逐步降低陶瓷半透膜外侧静压，使发酵结束前内外静压比为1:1；发酵结束后，快速增加陶瓷半透膜内反应体系静压使发酵结束前内外静压比为10:1，并逐步排出陶瓷半透膜外液体，得到相对粘度低于100的反应液。

4.根据权利要求3所述的一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，其特征在于，所述陶瓷半透膜与发酵罐壁之间的环形空腔中纯水的温度维持在16-37℃，保证反应体系温度的稳定性。

5.根据权利要求1所述的一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，其特征在于，所述步骤2的反应体系中，过氧化物的浓度为8％；氧化反应过程中体系的pH值控制在8，氧化反应温度为30℃，反应时间为6h。

6.根据权利要求1所述的一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，其特征在于，所述步骤3中，三氯化铁溶液以及磷酸钠溶液均加热至40℃再滴加至体系中。

7.根据权利要求1所述的一种畜禽补铁用右旋糖酐铁的双发酵制备方法，其特征在于，所述步骤4所得纯化后的右旋糖酐铁的分子量分布≤1.7。