[发明专利]一种分离检测L-焦谷氨酸及其对映异构体的方法

说明书

本发明涉及一种高效液相色谱法测定L‑焦谷氨酸中其对映异构体D‑焦谷氨酸含量的方法。该方法使用以涂覆直链淀粉为填料的色谱柱，烷烃类为流动相A，混合溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式，外标法测定L‑焦谷氨酸及其对映异构体。本发明提供的方法能准确分离和测定L‑焦谷氨酸中的对映异构体，专属性强，灵敏度高，准确度高，操作简单，便于有效控制L‑焦谷氨酸的中对映异构体的含量。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及用高效液相色谱法分离测定L-焦谷氨酸及其对映异构体的方法。

背景技术

L-焦谷氨酸(L-Pyroglutamic acid)是一种天然保湿剂，长期以来用作化妆品原料及氧化酶抑制剂，也是新型免疫促进剂匹多莫德、L-茶氨酸等药物的主要原料。近年来随着人们生活水平的提高，对化妆品及药品的需求量不断增加，L-焦谷氨酸的市场需求也随之增加。L-焦谷氨酸化学名称为(S)-(-)-2-吡咯烷酮-5-羧酸，其化学结构式如下：

L-焦谷氨酸的分子中存在1个手性中心，因此存在一个对映异构体，即D-焦谷氨酸。在生产L-焦谷氨酸的过程中需要进行质量控制。但目前《美国药典》USP、《欧洲药典》EP及《中国药典》Ch.P.均未收载，也无有关文献报道采用梯度洗脱的方法对L-焦谷氨酸及其对映异构体进行分离测定。为了更好更准确控制L-焦谷氨酸中对映异构体的含量，并最大限度控制在后续使用过程中带来质量方面的风险，发明人开发了适用于简单、快速、准确测定L-焦谷氨酸对映异构体含量的分析方法。

发明内容

本发明提供一种分离检测L-焦谷氨酸及其对映异构体的方法，其特征在于：

a)以涂覆直链淀粉类的填料为手性分离色谱柱；

b)以低级烷烃为流动相A，混合溶液为流动相B；

c)流动相采用梯度洗脱的方法，流动相流速为0.5～2.0mL/min，检测波长为200nm～280nm，柱温为20～45℃；

所述的手性分离色谱柱为CHIRALPAK AD-H，规格为250mm×4.6mm，5μm；

所述的混合溶液为三氟乙酸与醇类溶液的混合溶液；

所述的流动相的梯度洗脱方法如下：