[发明专利]脾脏切除注射法建立肺腺癌肝转移小鼠模型的方法在审
| 申请号： | 202210791084.X | 申请日： | 2022-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN115281150A | 公开（公告）日： | 2022-11-04 |
| 发明（设计）人： | 朱玲玲;周清华 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | A01K67/027 | 分类号： | A01K67/027;C12N5/071;C12N5/09 |
| 代理公司： | 北京盛凡佳华专利代理事务所(普通合伙) 11947 | 代理人： | 靳桂琳 |
| 地址： | 610041 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脾脏 切除 注射 建立 腺癌 转移 小鼠 模型 方法 | ||
【权利要求书】：
1.脾脏切除注射法建立肺腺癌肝转移小鼠模型的方法，其特征在于，步骤如下：
S1：制备表达荧光素酶基因luciferase的Lewis肺癌细胞单细胞悬浮液，其中细胞浓度为5×107/mL，后续每只小鼠的注射量为5×106个细胞/100μlPBS；
S2：准备4只6-8周龄的雄性C57BL/6J小鼠，进行脾脏注射，注射方式如下：
(1)给老鼠称重、麻醉备皮消毒，铺巾；
(2)切开左腹旁侧皮肤及肌肉；
(3)游离出脾脏，用一根4-0缝合线结扎脾脏中部，然后用手术电刀从结扎线一侧剪开脾脏，将脾脏分为两半；
(4)用胰岛注射针吸取步骤S1中的Lewis肺癌细胞悬浮液注射于(3)中分离出来的结扎的半个脾脏内，按照步骤S1中的注射量给每只小鼠注射100μlPBS细胞悬液，注射完成后等待3分钟后，将注射了Lewis肺癌细胞悬浮液的半个脾脏完全切除，将未注射Lewis肺癌细胞悬浮液的半个脾脏放回小鼠腹腔；
(5)补充腹水，缝合肌肉及皮肤，接种后第6、10、18天进行小动物活体成像证实形成肝转移灶，即肺腺癌肝转移小鼠模型。
2.根据权利要求1所述的脾脏切除注射法建立肺腺癌肝转移小鼠模型的方法，其特征在于，步骤S2(4)中Lewis肺癌细胞悬浮液的注射时间为3分钟。
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