[发明专利]一种灭活BK病毒及其用途

说明书

本发明涉及一种灭活BK病毒及其用途。具体地，本发明提供一种灭活BK病毒。本发明所述的灭活BK病毒能够用于制备有效预防和治疗BK病毒感染的疫苗，所述的灭活BK病毒疫苗可以引起高效的免疫应答，产生具有功能的BKV特异性CD4+T细胞、BKV壳蛋白特异性的结合抗体以及具有中和BKV病毒效果的中和抗体，从而能够有效地预防和治疗BK病毒感染。

技术领域

本发明涉及生物领域，具体地，本发明涉及一种灭活BK病毒及其用途。

背景技术

BK病毒是指BK virus，简称BKV，BK病毒(BKV)属多瘤病毒家族成员。BKV是一种潜伏感染的机会性病毒，成人血浆BKV抗体阳性率达90％以上，儿童感染率高达60％以上。BKV在健康人群中不致病，多为潜伏感染，但在免疫低下人群中(器官移植术后免疫抑制剂服用者、HIV感染者、孕妇和老人、白血病、化疗患者等)易活化且造成严重后果，例如引起1-10％的肾移植患者发生BKV相关肾病，若未能及时治疗易引起肾失功；引起50-100％的造血干细胞移植患者发生BKV尿症，并增加患出血性膀胱炎的概率；BKV增加一些肿瘤(膀胱癌、肾癌等)的发生率。目前，临床上尚无有效的预防或治疗BKV的药物，降低免疫抑制强度作为唯一可行的疗法又带来很大的器官排斥风险。因此，开发BKV疫苗对于预防BKV的感染和活化具有重要意义。

因此，本领域需要开发一种能够有效预防BK病毒的疫苗。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够有效治疗和预防BK病毒的疫苗。

本发明第一方面提供一种灭活BK病毒。

优选地，所述的灭活BK病毒的BK病毒来源包括：从临床BK病毒阳性患者的尿液获得BK病毒。

优选地，所述的灭活BK病毒包括经β-丙内酯处理BK病毒得到的灭活BK病毒。

本发明第二方面提供一种制备如本发明第一方面所述的灭活BK病毒的方法，所述的方法包括：

(1)制备BK病毒原液；

(2)向所述BK病毒原液中加入β-丙内酯处理，得到灭活BK病毒。

优选地，所述的步骤(1)包括：

(1.1)将BK病毒基因转染到TCCSUP细胞中，在培养基中培养，收集上清液，得到BK病毒原液。

优选地，所述的步骤(1)包括：

(1.1)将BK病毒基因转染到TCCSUP细胞中，在培养基中培养，收集上清液后，再将所述上清液加入到VERO-E6细胞中，在培养基中扩大培养，收集上清液，得到BK病毒原液。

优选地，所述的BK病毒基因的制备方法包括：

采用正向引物和反向引物对BK病毒基因组进行扩增，得到BK病毒基因。

优选地，所述的BK病毒基因包括环状基因。

优选地，所述的BK病毒基因的制备方法包括：

采用正向引物和反向引物对BK病毒基因组进行扩增后，对得到的线性化BK病毒基因连成环状基因，得到BK病毒基因。

优选例，所述的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

优选例，所述的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

优选地，所述的BK病毒基因的制备方法包括：