[发明专利]单克隆抗硫氰酸荧光素抗体及其应用

说明书

本发明涉及一种新的单克隆抗异硫氰酸荧光素(FITC)抗体、包括该抗体的试剂盒、及其相关应用。本发明的抗FITC抗体表现出针对FITC的高灵敏度和高特异性，能够用于FITC检测，并且可以作为通用指示试剂，通过FITC与其他免疫化学试剂桥联。FITC‑抗FITC抗体系统与生物素‑链霉亲和素系统具有相似的敏感性和稳定性，可以用于放大免疫检测信号，进而用于免疫检测如磁微粒分离酶联免疫检测、ELISA检测、免疫印迹检测、或流式检测等。

技术领域

本发明涉及荧光检测领域，并具体地涉及一种单克隆抗硫氰酸荧光素(FITC)抗体、包括该抗体的试剂盒及相关应用。

背景技术

异硫氰酸荧光素(FITC,Fluorescein Isothiocyanate)是一种荧光染料，能够吸收紫外光或蓝光，使得分子被激发后发出黄绿色光。一旦移除引起分子激发的紫外线或蓝光，黄绿色发光则会立刻停止。FITC的异硫氰酸基团可以与蛋白质的氨基末端或者伯胺反应，因而能够与蛋白质发生偶联，被广泛地用于抗体的标记。

FITC与抗体偶联后不丧失其抗原结合特异性，FITC偶联的抗体与待测抗原反应形成抗原-抗体复合物，该复合物上带有FITC标记，通过对FITC发光的检测，则可以快速、准确的检测出待测抗原。FITC也易与抗原结合，标记率高，FITC偶联的抗原也同理地可与待测抗体反应，形成抗原-抗体复合物，从而实现对抗体的检测。

目前现有的FITC抗体在灵敏度、特异性方面上都存在不足，还有较大的改善空间。因此，本领域仍需要一种具有高的特异性和灵敏度FITC抗体。

发明内容

如前所述，本领域需要一种具有高的特异性和灵敏度FITC抗体。

本发明人通过以FITC作为半抗原，与大分子载体蛋白偶联后诱导动物产生免疫应答，再利用杂交瘤技术获得既能无限增殖又能分泌抗FITC单抗的杂交瘤细胞株(分别命名为Y3B8-2C8、Y3G10-5G5和Y8D7-6E5，其中Y8D7-6E5于2022年06月16日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC No.45186，最后通过体外转瓶培养的方法收取上清，获得大量的抗FITC单克隆抗体，经筛选得到具有高灵敏度和高特异性的抗FITC的抗体。本发明的抗FITC抗体不仅能够用于FITC检测，而且可以作为通用指示试剂，将FITC与其他免疫化学试剂桥联。由此，实现了本发明。

在第一方面，本发明提供了一种单克隆抗硫氰酸荧光素(FITC)抗体，所述抗体的重链包括分别由SEQ ID NO:1-3所示的重链可变区V_H CDR1、V_H CDR2和V_H CDR3，所述抗体的轻链包括分别由SEQ ID NO:10-12所示的轻链可变区V_L CDR1、V_L CDR2和V_L CDR3，其中，SEQID NO:1所示序列为GFTFX₁X₂F，SEQ ID NO:2所示序列为SSDSRT，SEQ ID NO:3所示序列为SRAX₃YRSLX₄Y，其中X₁为S或I，X₂为S或T，X₃为F或Y，X₄为E或D。

在第二方面，本发明提供了一种杂交瘤细胞，所述杂交瘤细胞于2022年06月16日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号为CGMCC No.45186。

在第三方面，本发明提供了一种免疫检测方法，其包括使用第一方面所述的单克隆抗FITC抗体的步骤。

在第四方面，本发明提供了一种试剂盒，其包括第一方面所述的单克隆抗FITC抗体以及使用说明书。