[发明专利]一种GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法及应用

权利要求书

1.一种GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)代谢物前处理：从样本中提取代谢物，代谢物衍生化；

(2)样品检测：将前处理后的样品送入气相色谱-飞行时间质谱联用仪中进行检测，设置仪器参数，检测出峰；

(3)数据处理：使用数据分析软件对出峰数据进行分析，提取数据，与数据库比对定性，统计分析。

2.根据权利要求1所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，所述步骤1代谢物前处理，提取代谢物的具体方法，包括以下步骤：

A.取样品置于EP管中，加入预冷提取液，旋涡震荡20-50s；

B.冰水浴超声5-15min，然后放到离心机中离心10-20min；

C.将离心后的上清液取出150-200μL，各个样本混合成QC样本；

D.在真空浓缩器中干燥提取物。

3.根据权利要求2所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，所述步骤1代谢物前处理，代谢物衍生化的具体方法，包括以下步骤：

S1.向干燥后的提取物中加入甲氧胺盐试剂，混匀后，放入烘箱中70-80℃孵育20-50min；

S2.然后加入衍生化试剂，将混合物70-80℃孵育1-2h；

S3.冷却至室温，向步骤S2混合物中加入5μL FAMEs，上机检测。

4.根据权利要求2所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，所述预冷提取液为有机溶剂混合液，所述预冷提取液中含有体积分数为2-3％的核糖醇。

5.根据权利要求2所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，所述步骤1中样本选自固体样本或液体样本中的一种，优选的，在检测固体样本时，步骤B中需要加入钢珠研磨，研磨频率为40-50Hz，研磨时间为1-5min。

6.根据权利要求2所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，所述步骤B中离心机的温度为1-4℃，转速为10000-12000rpm，离心力13800×g。

7.根据权利要求3所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，所述步骤S1中甲氧胺盐试剂为将甲氧胺盐酸盐溶于吡啶中，甲氧胺盐酸盐的浓度为10-30mg/mL。

8.根据权利要求3所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，所述步骤S2中衍生化试剂为硅烷类衍生化试剂，选自双(三甲基硅烷基)乙酰胺、双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺、N-(叔丁基二甲基硅烷基)-N-甲基三氟乙酰胺、N-甲基三氟乙酰胺、N-甲基-n-(三甲基硅烷)三氟乙酰胺中的一种或几种的组合。

9.根据权利要求3所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法，其特征在于，所述步骤S2中衍生化试剂中含有体积分数为1-3％的三甲基氯硅烷。

10.一种根据权利要求1-9任一项所述GC-TOF-MS非靶标代谢组学分析方法的应用，其特征在于，应用于生物样本中非靶标代谢物的检测中。