[发明专利]增加塑料降解的蛋白酶在审
| 申请号： | 202210804895.9 | 申请日： | 2017-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN115927269A | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | A·马蒂;S·迪奎斯内;M·吉谢尔;M·维耶曼;M·本·卡勒德 | 申请（专利权）人： | 卡比奥斯公司 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64;C12N15/57;C12N15/70;C12N1/21;C08J11/10;C08L67/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人： | 孟凡宏;谢燕军 |
| 地址： | 法国圣*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 增加 塑料 降解 蛋白酶 | ||
1.蛋白酶变体，其(i)包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列并在S104L位置包含氨基酸取代，其中所述位置参考SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列编号，并且(ii)与SEQ ID NO:1的蛋白酶相比，表现出聚酯降解活性增加。
2.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶还包含至少一种选自以下的取代：N102S/F、S106T、N107T/I、G132I、G134K、D160E和Y167R。
3.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶还包含至少一种选自以下的取代：N102S/F、S106T、N107T/I、G132I、G134K和D160E。
4.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶包含至少一种选自以下的取代的组合：S104L+N107I、S104L+Y167R、N102F+S104L+S106T+N107I、N102F+S104L+D160E+Y167R、N102F+S104L+N107I+D160E+Y167R、N102F+S104L+S106T+N107I+Y167R、N102F+S104L+S106T+N107I+G132I、N102F+S104L+S106T+N107I+D160E+Y167R、N102F+S104L+S106T+N107I+G132I+Y167R和N102F+S104L+S106T+N107I+G132I+D160E+Y167R，其中所述位置参考SEQ ID NO:1的氨基酸序列编号。
5.根据权利要求4所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶包含至少一种选自以下的取代的组合：S104L+N107I、N102F+S104L+S106T+N107I和N102F+S104L+S106T+N107I+G132I，其中所述位置参考SEQ ID NO:1的氨基酸序列编号。
6.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶包含单个氨基酸取代S104L。
7.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶在N-末端包含其他序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO：42所示的全长氨基酸序列具有100％的同一性。
8.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:1的蛋白酶相比，表现出PLA降解活性增加。
9.编码权利要求1-8任一项所定义的蛋白酶变体的核酸。
10.包含权利要求9所述的核酸的表达盒或载体。
11.包含权利要求9所述的核酸或权利要求10所述的表达盒或载体的宿主细胞，其中所述宿主细胞不是植物细胞。
12.包含权利要求1-8任一项所定义的蛋白酶变体，或根据权利要求11所述的宿主细胞，或其包含所述蛋白酶变体的提取物的组合物。
13.一种产生蛋白酶的方法，包括：
在适于表达编码所述蛋白酶的核酸的条件下培养根据权利要求11所述的宿主细胞。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述方法进一步包括从细胞培养物回收所述蛋白酶。
15.一种降解包含至少一种聚酯的塑料产品的方法，包括：
将所述塑料产品与根据权利要求1-8任一项所述的蛋白酶或根据权利要求11所述的宿主细胞或根据权利要求12所述的组合物或具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的蛋白酶接触。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述方法进一步包括回收单体和/或低聚物。
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