[发明专利]用于鉴定草莓品种的SSR标记引物组及其应用有效
| 申请号： | 202210811346.4 | 申请日： | 2022-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN116179736B | 公开（公告）日： | 2023-10-27 |
| 发明（设计）人： | 刘丽锋;周厚成;汪君儒;宋艳红;赵霞;李刚 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院郑州果树研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 郑州亦鼎知识产权代理事务所(普通合伙) 41188 | 代理人： | 张夏谦 |
| 地址： | 450009*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 鉴定 草莓 品种 ssr 标记 引物 及其 应用 | ||
1.一种用于鉴定草莓品种的SSR标记引物组，其特征在于：所述SSR标记引物组包括以下9对SSR标记引物：C50、P33、ZP27、YS19、FSS143、YS9、YS22、1245、8149，其核苷酸序列依次如SEQ ID NO：1-18所示。
2.一种如权利要求1所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用。
3.根据权利要求2所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用，其特征在于：所述应用包括：提取不同品种草莓的DNA作为模板，利用SSR标记引物组进行PCR扩增，对扩增产物进行分析，构建得到不同品种草莓的特征指纹图谱。
4.根据权利要求3所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用，其特征在于：所述应用还包括：提取待测品种草莓的DNA作为模板，利用SSR标记引物组进行PCR扩增，对扩增产物进行分析，并与构建得到的不同品种草莓的特征指纹图谱进行比较，鉴定待测品种草莓的纯度和真实性。
5.根据权利要求3或4所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用，其特征在于：所述提取草莓的DNA采用CTAB法。
6.根据权利要求3或4所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用，其特征在于：所述PCR扩增的反应体系为：50-100ng/μL草莓DNA 1μL，5U/μL Taq酶0.05μL，2.5mmol/L dNTPMixture 0.8μL，10×PCR Buffer 1μL，10μmol/L正反引物各0.25μL，水6.65μL。
7.根据权利要求6所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用，其特征在于：所述PCR扩增的反应程序为：94℃预变性2分钟，94℃变性30秒，52-59℃退火30秒，72℃延伸30秒，72℃终延伸10分钟，设置35个循环。
8.根据权利要求3或4所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用，其特征在于：所述分析为：对扩增产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，染色后显色，分析带型。
9.根据权利要求8所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用，其特征在于：所述电泳采用6％的非变性聚丙烯酰胺凝胶，跑胶条件为：120V恒定电压1.5小时。
10.根据权利要求8所述的SSR标记引物组在草莓品种鉴定中的应用，其特征在于：所述SSR标记引物组中引物对C50、P33、ZP27、YS19、FSS143、YS9、YS22、1245、8149对应分别有20、4、3、14、6、10、3、2、9种带型。
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