[发明专利]一种用于精神分裂症诊断的环状RNA标志物及试剂盒

说明书

本发明公开了一种精神分裂症早期诊断标志物的组合物，所述标志物的组合物包括hsa_circ_0004442、hsa_circ_MYO9A‑66和hsa_circ_CDR1as三种circRNA。根据AUC、灵敏度和特异度等指标，本发明标志物的组合表现出更好的判别性能，可作为精神分裂症诊断的潜在生物标志物。同时，本发明还证实了服用利培酮4周后患者血清细胞外囊泡中标志物的表达发生显著改变，可见三者的表达水平与治疗过程存在相关性。本发明为血清细胞外囊泡中异常表达的circRNAs参与精神分裂症的发病提供了进一步的证据，也证实异常表达的circRNAs有成为精神分裂症诊断和治疗的生物标志物的潜力。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，特别涉及一种用于精神分裂症诊断的环状RNA标志物及试剂盒。

背景技术

精神分裂症影响全球约1％人口，精神病院80％～90％以上的住院病人为精神分裂症患者。精神分裂症的病因非常复杂，截止目前也没有明确的结论。不论精神分裂症的遗传学研究还是神经影像学研究，均无法解释该疾病的所有病理生理现象。除了精神分裂症的病因尚不清楚之外，其诊断也存在争议。同其他主要精神疾病一样，精神分裂症的诊断标准主要基于症状和体征，而非病理和生理基础，也无相关的生理、生化诊断指标。因此，探究精神分裂症的生物标志物和发病机制已成为精神疾病研究的热点。

细胞外囊泡是活细胞分泌到细胞外基质中的一种直径约30～150nm的膜性囊泡，广泛存在于血液等各种体液之中。细胞外囊泡具有膜性囊泡结构，所以可以保护其内含物在通过长时间、远距离的运输不受降解，仍能保持其生物活性。细胞外囊泡能够整合到细胞膜上，也可以通过血脑屏障。

细胞外囊泡包含许多种类的RNAs，例如miRNA、mRNA和circRNAs等。circRNAs是mRNA在剪接过程中形成的一类的闭合环状RNA分子，其不具有5‘末端帽子和3’末端poly(A)尾巴，多数属于非编码RNA分子，少数也能够翻译成蛋白。circRNAs因其特殊结构，不易被核酸外切酶降解，要比血液中的线性RNA更加稳定。circRNAs在真核细胞和组织中特异性表达，与相应的miRNA结合，通过充当miRNA的海绵，从而调节mRNA的表达。随着下一代测序技术的发展，已证实circRNAs在细胞增殖、凋亡、转移和炎症等关键生物学过程中发挥特定的生物学作用。CircRNAs在哺乳动物的大脑中尤其丰富，可能在参与神经发育和功能的发挥、维持大脑健康和预防神经精神疾病的发生中扮演重要角色。多项研究证实，circRNAs是正常的发育过程、生理和疾病状态，包括癌症、精神疾病和心血管疾病发生中的重要调节因子。同时，也有研究揭示了circRNAs与神经系统疾病之间的关系。目前已证实circRNAs参与多种神经精神疾病，如精神分裂症、抑郁症、阿尔茨海默病(AD)、癫痫和帕金森病(PD)等疾病的发生和发展。

有研究表明，在精神分裂症患者的外周血中发现了异常表达的circRNAs，可能参与了精神分裂症的发病过程。姚等人(2019)证实，hsa_circRNA_104597在精神分裂症患者外周血单核细胞(PBMC)中的表达水平显着下调；经抗精神病药物治疗8周后，hsa_circRNA_104597的表达水平变为显着上调；因此，揭示了hsa_circRNA_104597可以作为精神分裂症诊断和治疗潜在的生物标志物。

尽管现有技术中存在利用circRNAs作为标志物来诊断精神分裂症的技术方案，但其效果却不尽如人意，主要体现在特异性和灵敏度等相关指标偏低。因此，寻找一种更好的circRNAs标志物已成为当务之急。

发明内容

本发明的一个方面，是针对现有技术中精神分裂症的诊断标志物存在特异性和灵敏度等相关指标偏低的缺陷，提供了一种用于精神分裂症诊断的环状RNA标志物及试剂盒。