[发明专利]一种全分子IgG抗体及其制备方法和应用

说明书

一种全分子IgG抗体及其制备方法和应用，所述抗体轻链抗原互补区CDR的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.5，SEQ ID NO.6，SEQ ID NO.7所示；抗体重链抗原互补区CDR的氨基酸序列分为SEQ ID NO.8，SEQ ID NO.9，SEQ ID NO.10所示。本发明所制备的抗体，可有效与EVA71相结合，显示了良好的结合特性，可以用于识别并阻断EVA71感染。

技术领域

本发明属生物制药领域，涉及一种人鼠嵌合抗肠道病毒(Enterovirus，EV)A71衣壳的全分子IgG抗体，还涉及上述全分子IgG抗体的DNA分子、表达载体、宿主细胞和应用。

背景技术

单克隆抗体技术已在疾病的诊断和治疗等发挥巨大的作用，极大提高了医疗技术水平，但常规的鼠或其它动物来源抗体因涉及动物使用一直受动物伦理争议，同时因其来源可引起很强的异种免疫反应，在人体应用受到很大限制。尽管国内已不少基于小鼠单克隆抗体的抗EVA71的开发和应用，但尚没有基因工程化及人鼠嵌合抗体的进一步应用。EVA71为肠道病毒71型是引起婴幼儿手足口病(hand-foot and mouth disease；HFMD)主要病原体之一。在我国家仍有很高感染率，呈现区域性流行的趋势。因此，临床检测及可用的被动保护抗体也是十分必要。

人鼠嵌合工程化抗体技术也已日渐成熟，已是改变抗体分子本身免疫原性和功能特征的重要方法，同时保持抗体特定的识别特异性。目前已公布的以EVA71相关抗体多以小鼠为主，可用于临床检测开发等。本发明所制备的抗体，可有效与EVA71相结合，显示了良好的结合特性，且尚无相关功能的人鼠嵌合工程化抗体的文献报道。

发明内容

解决的技术问题：本发明旨在提供一种人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全分子IgG抗体及其制备方法和应用，该抗体能够识别并阻断EVA71感染。

技术方案：一种人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全分子IgG，所述抗体轻链抗原互补区CDR的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.5，SEQ ID NO.6，SEQ ID NO.7所示；抗体重链抗原互补区CDR的氨基酸序列分为SEQ ID NO.8，SEQ ID NO.9，SEQ ID NO.10所示。

一种人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全分子IgG，所述抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示，抗体重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.4所示。

一种人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全VP1分子IgG，抗体轻链可变区的核酸序列为SEQID NO.1所示，抗体重链可变区的核酸序列为SEQ ID NO.2所示。

一种人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全分子IgG，抗体的轻链氨基酸序列为SEQ IDNO.11所示，重链氨基酸序列为SEQ ID NO.12所示。

含有上述核酸序列的质粒。

含有所述质粒的真核细胞。

上述人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全分子IgG在制备检测EV71试剂盒中的应用。

上述人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全分子IgG在制备阻断EV71感染诊断或治疗药物中的应用。

一种检测试剂盒，含有上述人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全分子IgG。

一种阻断EV71感染药物，含有上述人鼠嵌合抗EVA71衣壳蛋白全分子IgG。

有益效果：本发明所制备的抗体，可有效与EVA71相结合，显示了良好的结合特性，可以用于识别并阻断EVA71感染。

附图说明

图1为SDS-PAGE检测图，M：Protein Marker 1：纯化浓缩抗体；

图2为酶联免疫吸附实验示意图；