[发明专利]一种构建可通过药物诱导Cas9蛋白表达的模型猪的方法在审
| 申请号： | 202210822307.4 | 申请日： | 2022-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN115992176A | 公开（公告）日： | 2023-04-21 |
| 发明（设计）人： | 赖良学;王可品;金琴 | 申请（专利权）人： | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/63;C12N15/55;A01K67/027;A61K49/00 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 王艳斋 |
| 地址： | 510530 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 构建 通过 药物 诱导 cas9 蛋白 表达 模型 方法 | ||
1.一种构建可通过药物诱导Cas9蛋白表达的模型猪的方法，其特征在于，所述方法包括：
将rtTA调控元件敲入猪细胞基因组Rosa26位点，将Cas9蛋白表达元件敲入猪细胞基因组Hipp11位点；
所述rtTA调控元件含有rtTA蛋白编码基因；
所述Cas9蛋白表达元件含有TRE3G启动子和Cas9蛋白编码基因，所述TRE3G启动子启动Cas9蛋白编码基因表达。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述rtTA调控元件敲入Rosa26位点的第一个内含子中。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述rtTA蛋白编码基因的核酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列；
优选地，所述Cas9蛋白编码基因包括SpCas9蛋白编码基因；
优选地，所述SpCas9蛋白编码基因的核酸序列包括SEQ ID NO.2所示的序列；
优选地，所述TRE3G启动子的核酸序列包括SEQ ID NO.3所示的序列。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述rtTA调控元件还含有药物筛选标记基因；
优选地，所述药物筛选标记基因包括neo基因；
优选地，所述neo基因的核酸序列包括SEQ ID NO.4所示的序列；
优选地，所述rtTA调控元件的核酸序列包括SEQ ID NO.5所示的序列。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述Cas9蛋白表达元件还含有药物筛选标记基因；
优选地，所述药物筛选标记基因包括puro基因；
优选地，所述puro基因的核酸序列包括SEQ ID NO.6所示的序列。
6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述Cas9蛋白表达元件还含有报告基因；
优选地，所述报告基因包括tdTomato基因；
优选地，所述tdTomato基因的核酸序列包括SEQ ID NO.7所示的序列；
优选地，所述Cas9蛋白表达元件的核酸序列包括SEQ ID NO.8所示的序列。
7.权利要求1-6任一项所述的构建可通过药物诱导Cas9蛋白表达的模型猪的方法在对猪进行基因编辑中的应用。
8.一种对猪进行基因编辑的方法，其特征在于，所述方法包括；
利用权利要求1-6任一项所述的构建可通过药物诱导Cas9蛋白表达的模型猪的方法构建模型猪，将基因编辑元件导入所述模型猪的细胞中进行基因编辑。
9.根据权利要求8所述的对猪进行基因编辑的方法，其特征在于，所述基因编辑元件包括向导RNA和/或外源基因表达盒。
10.由权利要求1-6任一项所述的构建可通过药物诱导Cas9蛋白表达的模型猪的方法或权利要求8或9所述的对猪进行基因编辑的方法构建的模型猪在药物实验和药物筛选中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院广州生物医药与健康研究院，未经中国科学院广州生物医药与健康研究院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202210822307.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
