[发明专利]一种抗肿瘤融合外泌体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202210827721.4 | 申请日： | 2022-07-14 |
| 公开（公告）号： | CN115869417B | 公开（公告）日： | 2023-10-10 |
| 发明（设计）人： | 陈真真;李柄豫;陈亚兰;王小惜;朱雪芹;王艳;张文彦;刘子迈;刘思家 | 申请（专利权）人： | 郑州大学 |
| 主分类号： | A61K47/46 | 分类号： | A61K47/46;A61K47/24;A61K47/28;A61K38/19;A61K38/18;A61K48/00;A61K31/665;A61K47/62;A61K47/69;A61P35/00;C12N5/071;C12N5/09;C07K19/00;C07K14/0 |
| 代理公司： | 郑州亦鼎知识产权代理事务所(普通合伙) 41188 | 代理人： | 左子楷 |
| 地址： | 450001 河南省郑州市市*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 肿瘤 融合 外泌体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗肿瘤融合外泌体，其特征在于：所述融合外泌体以肿瘤细胞来源的外泌体与脂质体融合形成的杂合纳米颗粒作为载体，所述融合外泌体中携带表达趋化因子XCL1和生长因子FLT3L的质粒。
2.根据权利要求1所述的抗肿瘤融合外泌体，其特征在于：所述融合外泌体的表面负载脂肪酸链修饰的MMP-2酶响应多肽；
和/或，所述融合外泌体膜磷脂双分子层的疏水腔中负载激动剂MPLA。
3.根据权利要求2所述的抗肿瘤融合外泌体，其特征在于：所述脂肪酸链修饰的MMP-2酶响应多肽为C16-RRKKPLGLAG-ATWLPPRAANLLMAAS。
4.根据权利要求1所述的抗肿瘤融合外泌体，其特征在于：所述肿瘤细胞包括结直肠癌细胞、肝癌细胞、肺癌细胞、卵巢癌细胞，优选为结直肠癌细胞。
5.根据权利要求1所述的抗肿瘤融合外泌体，其特征在于：所述脂质体采用Lipo2000，或者采用mRNA疫苗的脂质递送系统LNP。
6.一种如权利要求1所述的抗肿瘤融合外泌体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)将表达趋化因子XCL1和生长因子FLT3L的质粒与脂质体混合，得到复合物；
(2)将肿瘤细胞来源的外泌体与所述复合物混合，得到融合外泌体。
7.根据权利要求6所述的抗肿瘤融合外泌体的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述混合后孵育15-30min，得到复合物；
和/或，步骤(2)中，将肿瘤细胞来源的外泌体与所述复合物、脂肪酸链修饰的MMP-2酶响应多肽、MPLA混合，于35-40℃孵育10-16h。
8.根据权利要求7所述的抗肿瘤融合外泌体的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述孵育后，对融合外泌体进行纯化处理，之后利用纳米挤出器反复挤压5-15次，过膜后即得。
9.一种如权利要求1-5中任一项所述的抗肿瘤融合外泌体在抑制肿瘤生长中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述抗肿瘤融合外泌体在肿瘤组织中招募cDC1、促进cDC1成熟、和/或激活CD8+T细胞中的应用。
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