[发明专利]鉴别猪流行性腹泻病毒强弱毒株的探针、引物及其试剂盒

权利要求书

1.一种向导RNA探针，其特征在于，其核酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。

2.根据权利要求1所述向导RNA探针，其特征在于，所述向导RNA探针的靶基因为猪流行性腹泻病毒中ORF3基因。

3.如权利要求1所述向导RNA探针在制备检测猪流行性腹泻病毒强毒株产品中的应用。

4.一种用于检测猪流行性腹泻病毒的CRISPR-Cas13系统，其特征在于，包括：Cas13a核酸酶、如权利要求1所述向导RNA探针、FB-RNA报告分子；如权利要求1所述向导RNA探针针对猪流行性腹泻病毒中ORF3基因，Cas13a核酸酶通过在向导RNA探针识别靶基因后，激活酶活性，并对FB-RNA报告分子进行切割，释放检测信号。

5.根据权利要求4用于检测猪流行性腹泻病毒的CRISPR-Cas13系统，其特征在于，还包括：RNases抑制剂、核糖核酸和T7聚合酶。

6.针对猪流行性腹泻病毒的引物对，其特征在于，包括：RAA-F和RAA-R，其核酸序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。

7.一种试剂盒，其特征在于，包括：RAA试剂盒，以及如权利要求4或5所述用于检测猪流行性腹泻病毒的CRISPR-Cas13系统。

8.如权利要求7所述试剂盒，其特征在于，RAA试剂盒中包括：如权利要求6所述针对猪流行性腹泻病毒的引物对。

9.如权利要求7所述试剂盒，其特征在于，还包括胶体金免疫试纸条。

10.一种如权利要求7-9任一项所述试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)采用RAA试剂盒，以样本DNA为模板对ORF3基因进行扩增；

(2)采用如权利要求4或5所述用于检测猪流行性腹泻病毒的CRISPR-Cas13系统对ORF3基因特异性识别，对检测信号进行检测以判断待检样品是否含有猪流行性腹泻病毒强毒株。