[发明专利]一种小分子药物在促进小鼠毛发再生中的应用

权利要求书

1.一种促进小鼠毛发再生的小分子药物的制备方法，其特征在于，所述促进小鼠毛发再生的小分子药物的制备方法包括以下步骤：

步骤一，进行充质干细胞冻干粉原液的制备：获取新鲜的脐带，对新鲜脐带进行预处理后得到脐带组织；对脐带组织依次进行原代提取、传代培养以及预处理后，制备得到充质干细胞冻干粉原液，备用；

步骤二，进行中药提取物的制备：将何首乌干燥块根粉碎后，利用乙醇对何首乌粉末进行提取后，再利用大孔树脂吸附柱分离纯化，得到何首乌提取液；分别将干姜和旱莲草粉碎后用乙醇在提取罐中回流提取，经萃取得到干姜提取液和旱莲草提取液；将三种提取液合并，得到中药提取物，备用；

步骤三，进行小分子药物的制备：分别进行小分子药物制备原料的称取；将称取后的原料依次进行混合搅拌，干燥，制得以纳米小分子材料为载体的促进小鼠毛发再生的小分子药物。

2.如权利要求1所述促进小鼠毛发再生的小分子药物的制备方法，其特征在于，所述步骤一中的充质干细胞冻干粉原液的制备方法包括：

(1)获取新鲜的脐带，并对脐带进行预处理后，得到脐带组织；

(2)将脐带组织利用PBS缓冲液处理后，沥净多余液体，切碎，加入由胶原酶、解离酶、胰蛋白酶以及DNA酶组成的酶消化液中，37℃震荡消化处理2～4h，得到脐带组织消化液；

(3)将脐带组织消化液进行过滤并在过滤后的液体中加入含有10％的胎牛血清的DMEM培养基，混合，离心弃上清，得到脐带组织细胞团；

(4)利用DMEM培养基重悬步骤(3)得到的脐带组织细胞团，将重悬后的细胞培养液移入到细胞培养瓶中进行传代培养，得到传代培养产物；

(5)对所述传代培养产物添加生理盐水进行重悬后，依次进行冻融、超声和过滤处理后，得到充质干细胞冻干粉原液。

3.如权利要求2所述促进小鼠毛发再生的小分子药物的制备方法，其特征在于，所述对脐带进行预处理的方法包括：

采用酒精和生理盐水对获取的脐带进行清洗和消毒处理；

利用消毒后的医用剪刀将清洗和消毒处理后的脐带剪成2～4cm的段状；

将得到的段状脐带的脐静脉内侧剖开脐带，将脐静脉、脐动脉以及脐带包膜从脐带中去除，得到脐带组织。

4.如权利要求1所述促进小鼠毛发再生的小分子药物的制备方法，其特征在于，所述步骤二中的何首乌提取液的制备方法包括：

(1)将何首乌干燥块根粉碎后过100～120目筛，得何首乌粉末；

(2)将何首乌粉末用50％的乙醇在10～35℃的条件下提取2～3次，过滤，合并滤液，得何首乌粗提物；

(3)将何首乌粗提物采用大孔树脂吸附柱分离纯化后，采用硅胶柱精制，得到何首乌提取液。

5.如权利要求1所述促进小鼠毛发再生的小分子药物的制备方法，其特征在于，所述步骤二中的干姜提取液的制备方法包括：

(1)将干姜粉碎后，用95％乙醇在提取罐中回流提取2～4次，冷却过滤，并合并过滤后的提取液；

(2)利用回收装置进行提取液中乙醇的回收，回收至无醇味后，将提取液在55～65℃的条件下进行减压浓缩，得到干姜膏体；

(3)将浓缩后的干姜膏体用乙醚、氯仿、正己烷中的至少一种萃取三次，合并三次的萃取液，得到干姜提取液。

6.如权利要求1所述促进小鼠毛发再生的小分子药物的制备方法，其特征在于，所述步骤二中的旱莲草提取液的制备方法包括：

(1)取旱莲草全株，洗净后干燥，粉碎过筛80～120目，得旱莲草粉末；

(2)向旱莲草粉末中加入助溶剂并浸泡并过滤，浓缩，以充分除去其中的有机溶剂，得旱莲草粗提液；

(3)向旱莲草粗提液中加入萃取剂，分离其中的极性小组份并除去，萃余液减压蒸馏并充分除去其中的有机溶剂，加入去离子水并充分搅拌后，将其中的不溶性的沉淀物过滤后，得旱莲草提取液。