[发明专利]具有协同抑菌作用的有效部位的制备方法及应用

说明书

本发明提供了一种具有协同抑菌作用的有效部位的制备方法及应用，将枳实加水煎煮至少两次，每次1‑2小时，合并煎液，过滤，滤液通过常压蒸发，浓缩成相对密度为1.20‑1.40的浓缩液，冷却后，加等体积的乙醇，搅拌，静置，过滤，得滤渣和滤液，得枳实样液，减压浓缩枳实样液浓缩成稠膏A，回收乙醇；大黄、厚朴分别用体积百分比为75‑85%的乙醇溶液浸渍24‑36小时，过滤，将大黄、厚朴的滤液合并，并通过减压浓缩成稠膏B，回收乙醇；将稠膏A和稠膏B混合加水稀释后上D101大孔树脂，用乙醇水溶液洗脱，得到乙醇洗脱液，将50%乙醇洗脱液收集并浓缩后得到样品A。样品A与苯唑西林钠联合使用，对耐甲氧西林金葡球菌（MRSA）具有协同的抑菌活性。

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及一种具有协同抑菌作用的有效部位的制备方法及应用。

背景技术

自1961年发现了第一株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistantStaphylococcus aureus，MRSA)后，20世纪80年代至今MRSA已成为全球医院感染的重要病原菌。MRSA对包括青霉素、头孢菌素和头霉素类等β-内酰胺类抗生素、氨基糖苷类、喹诺酮类甚至糖肽类抗菌药物都存在不同程度的耐药。因此，寻找开发新的抗菌药物迫在眉睫。

枳实中主要成分为辛弗林等生物碱类成分和橙皮苷等黄酮类成分，大黄中的主要成分为大黄酸、大黄素等蒽醌类成分，厚朴中主要含有厚朴酚等木脂素类成分，上述化学成分也具有不同程度的抑菌活性。

发明内容

针对现有技术问题，本发明的第一目的在于提供了一种具有协同抑菌作用的有效部位的制备方法，第二目的在于提供其应用。

为实现以上第一目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种具有协同抑菌作用的有效部位的制备方法，其特征在于，按照如下步骤制备：

1)将枳实加水煎煮至少两次，每次1-2小时，合并煎液，过滤，滤液通过常压蒸发，浓缩成相对密度为1.20-1.40的浓缩液，冷却后，加等体积的乙醇，搅拌，静置，过滤，得滤渣和滤液，得枳实样液，减压浓缩枳实样液浓缩成稠膏A，回收乙醇；

2)大黄、厚朴分别用体积百分比为75-85％的乙醇溶液浸渍24-36小时，过滤，将大黄、厚朴的滤液合并，并通过减压浓缩成稠膏B，回收乙醇；

3)将稠膏A和稠膏B混合加水稀释后上D101大孔树脂，用乙醇水溶液洗脱，得到乙醇洗脱液，浓缩后得到样品，大黄、厚朴枳实按如下重量份数添加大黄200-400份、厚朴400-800份、枳实200-400份。

上述方案中，步骤1)中，枳实加水煎煮三次。

上述方案中，步骤1)中，滤渣用体积百分比50％的乙醇洗涤2-3次，合并洗涤液与滤液成为枳实样液。

上述方案中，步骤3)中乙醇水溶液的体积百分比分别为10％，30％，50％，70％。

上述方案中，步骤3)中乙醇水溶液的体积百分比为50％。

本发明的第二目的是这样实现的：所述制备得到的样品与苯唑西林作为协同抑制耐甲氧西林金葡球菌药物的应用。

本发明对枳实采用水提醇沉，充分将其含有的生物碱和黄酮类成分与其他杂质分离。大黄、厚朴使用75-85％乙醇回流提取，可以更高效的获得大黄中脂溶性较强的大黄素、大黄酸等成分和厚朴中脂溶性较强的厚朴酚等木脂素类成分，此法比原有仅适用水提取获取的有效部位的含量更高。

混合3种中药材的浸膏，水稀释后上D101大孔树脂得到的50％乙醇洗脱液，即样品A与苯唑西林钠联合使用，对耐甲氧西林金葡球菌(MRSA)具有协同的抑菌活性。

具体实施方式

下面将结合实施例，对本发明做进一步的描述。

实施例1