[发明专利]一种EZH2共价抑制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种EZH2共价抑制剂及其制备方法和应用，属于化学医药领域。该EZH2共价抑制剂为式I所示化合物。该化合物能够与EZH2发生共价结合，对EZH2^WT和EZH2^MUT均展现出低纳摩尔水平的抑制活性，对由EZH2过表达或由EZH2突变导致的疾病均具有优良的治疗潜力；该化合物可有效抑制肿瘤细胞的增殖，洗脱后仍然发挥持续抑制活性，能够预防耐药性的产生，效果显著优于已上市的EZH2抑制剂EPZ6438；该化合物在异种移植瘤模型中的抗肿瘤活性的效果也显著优于已上市的EZH2抑制剂EPZ6438。本发明提供的化合物作为EZH2共价抑制剂，可以用来制备预防和治疗由EZH2过表达或由EZH2突变导致的疾病，为临床药物的开发和应用提供了新的选择。

技术领域

本发明属于化学医药领域，具体涉及一种EZH2共价抑制剂及其制备方法和应用。

背景技术

组蛋白赖氨酸甲基转移酶EZH2是多梳家族蛋白PRC2复合物的催化组分，可通过催化组蛋白H3第27位赖氨酸(H3K27)发生三甲基化而抑制靶基因的表达。研究发现，相对正常组织来说，EZH2在多种癌组织(例如乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、宫颈癌、淋巴瘤等)中表达异常增高，且其表达越高，肿瘤恶性度越高，预后越差。

除了表达水平的异常，EZH2基因的突变也与肿瘤的发生发展密切相关。比如，研究发现22％的弥漫性大B细胞性淋巴瘤的生发中心、7％的滤泡性淋巴瘤以及12％～23％的脊髓发育不良和骨髓增生性疾病患者的体细胞中，均存在EZH2基因的突变。目前已经检测到的EZH2基因突变主要位于EZH2的SET结构域第641位酪氨酸(Y641N、F、S或H)、第677位丙氨酸突变为甘氨酸(alanine 677 glycin，A677G)和第687位丙氨酸突变为缬氨酸(alanine687 valine，A687V)。与EZH2的过表达不同，EZH2基因突变导致H3K27me3丰度在全基因组范围内显著上升。也就是说，EZH2过表达、EZH2基因突变都与许多肿瘤的发生发展密切相关，并与肿瘤的不良预后有关联。开发出能够有效抑制野生型EZH2和突变型EZH2的药物对治疗临床预防和治疗肿瘤具有重要意义。

目前，已经有多个靶向EZH2的小分子化合物进入临床。其中，已上市的EPZ6438作为一种有效的EZH2可逆抑制剂，能够浓度依赖性的降低野生型或SMARCB1突变细胞中总体H3K27Me3水平，并引起去除SMARCB1的MRT细胞系中强的抗增殖作用。但是，作为一种EZH2可逆抑制剂，EPZ6438存在以下问题：(1)EPZ6438对EZH2的作用强度不够，抑制活性有限；(2)EPZ6438的半衰期较短，给药剂量较大；(3)EPZ6438对EZH2靶蛋白难以产生持续抑制作用，易产生耐药。为了克服上述问题，亟需开发出一种对EZH2的作用强度更大，且不易产生耐药性的新EZH2抑制剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种EZH2共价抑制剂及其制备方法和应用。

本发明提供了式Ⅰ所示的化合物、其同位素标记化合物或其药学上可接受的盐：

其中，R₁、R₂、R₃各自独立地选自H、C_1-6烷基；或者，R₁选自H、C_1-6烷基，R₂、R₃连接形成5～8元饱和环烷基；

R₄选自H、C_1-6烷基；

R₅选自未被取代或被取代基取代的以下基团：3～8元饱和环烷基、3～8元饱和杂环基；所述饱和杂环基中的杂原子选自N、O或S，杂原子个数为1～3个；所述取代基选自C_1-6烷基；