[发明专利]一种酶解提取制备千金藤素的方法

说明书

本发明公开了一种酶解提取制备千金藤素的方法，包括山乌龟药材粉碎、水浸泡、混合生物酶酶解、有机溶剂回流提取、酸溶、碱沉、重结晶等步骤。本发明酶解步骤大大减少了药材中淀粉对后续提取纯化步骤的影响，且使除杂更容易，仅通过酸溶、碱沉、重结晶即可得到千金藤素纯品，工艺简单，操作方便，成本低廉，千金藤素产品收得率高，是制备千金藤素的一种好方法。

技术领域

本发明属于中药材加工技术领域，具体涉及一种酶解提取制备千金藤素的方法。

背景技术

山乌龟为防己科千金藤属StephaniaLour植物的块根，此块根硕大露于地面，故名山乌龟，主产于长江流域及以南各地，为民间常用药。其中一种山乌龟(Stephaniaepigaea)主用于提升白细胞、清热解毒、消炎止痛、毒蛇咬伤、无名肿毒等作用。其主要药用成分千金藤素(Cepharanthine)含量较高，用于肿瘤病人放射治疗或因苯等有机溶剂引起的白细胞减少，已取得良好效果。CN113046327A公开千金藤素在抗新冠病毒SARS COV 2方面表现出异常强的活性，因此具有广阔的应用前景。

千金藤素的分子结构式如下：

为更好地开发、利用山乌龟块根的药用价值，提高山乌龟块根千金藤素的产量，降低千金藤素的生产成本，还需要深入研究千金藤素的提取制备技术。

发明内容

本发明提供一种千金藤素的提取制备方法，包括以下步骤：

1)材料准备：取山乌龟药材，粉碎至10～60目，加入药材重量1～3倍的水浸泡8-30小时；

2)酶解：加入药材重量0.3％～1.5％混合生物酶酶解1～5小时，所述混合生物酶由纤维素酶和α-淀粉酶组成，二者的质量比为1～5:1；所述酶解在40℃～55℃，pH 5.0～7.0条件下进行；

3)提取：加入药材重量4～10倍的50％～95％甲醇或乙醇回流提取2～3次，每次2～3小时，合并提取液，浓缩后得稠膏；

4)酸溶、碱沉：往稠膏中加入1～4倍稠膏重量的2wt％～10wt％盐酸或硫酸水溶液，加热、搅拌、溶散后冷却至室温，过滤，得酸性滤液，再用2wt％～15wt％的NaOH溶液或KOH溶液调节pH至9～10，静置沉淀8-30小时，过滤，得到的固体为千金藤素粗品；

5)重结晶：千金藤素粗品在有机溶剂中重结晶，得千金藤素纯品。

进一步地，所述千金藤素的提取制备方法包括以下步骤：

1)材料准备：取山乌龟药材，粉碎至30～40目，加入药材重量1.5～2倍的水浸泡12-24小时；

2)酶解：加入药材重量0.6％～1％混合生物酶酶解1～3小时，所述混合生物酶由纤维素酶和α-淀粉酶组成，二者的质量比为2～4:1；所述酶解在48℃～52℃，pH 5.8～6.2条件下进行；

3)提取：加入药材重量5～8倍的70％～90％甲醇或乙醇回流提取2～3次，每次2～3小时，合并提取液，浓缩后得稠膏；

4)酸溶、碱沉：往稠膏中加入2～3倍稠膏重量的5wt％～8wt％盐酸或硫酸水溶液，加热、搅拌、溶散后冷却至室温，过滤，得酸性滤液，再用5wt％～10wt％的NaOH溶液或KOH溶液调节pH至9～10，静置沉淀12-20小时，过滤，得到的固体为千金藤素粗品；

5)重结晶：千金藤素粗品在有机溶剂中重结晶，得千金藤素纯品。

在一实施方案中，所述千金藤素的提取制备方法包括以下步骤：

1)材料准备：取山乌龟药材，粉碎至30～40目，加入药材重量2倍的水浸泡24小时；