[发明专利]一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测卡、试剂盒及其制备方法和使用方法

权利要求书

1.一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测卡，包括塑料外壳，其中所述塑料外壳上设有加样孔和观察窗，所述塑料外壳内装有犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试纸条，所述犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试纸条包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水纸、底板，所述底板的上部贴合有所述硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上部两端分别贴合有所述金标垫和所述吸水纸，所述金标垫上部一端贴合有所述样品垫，所述加样孔在所述样品垫上方，所述观察窗在所述检测线和所述质控线上方，其特征在于，所述金标垫上固定有胶体金标记的抗犬细小病毒单克隆抗体和胶体金标记的犬冠状病毒单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜依次设有包被犬细小病毒多克隆抗体和犬冠状病毒多克隆抗体的检测线和包被羊抗小鼠IgG的质控线。

2.权利要求1所述的一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测卡，其特征在于，所述金标垫含有1％～5％氯化钠浸泡液和5％～10％犬血清白蛋白。

3.权利要求1或2所述的一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测卡，其特征在于，所述检测线有两条，分别包被所述犬细小病毒多克隆抗体和所述犬冠状病毒多克隆抗体。

4.一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～3所述的一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测卡，还包括样本稀释液。

5.权利要求4所述的一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试剂盒，其特征在于，所述样本稀释液包括阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂，所述非离子表面活性剂和所述阴离子表面活性剂的摩尔比为15～80。

6.权利要求5所述的一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试剂盒，其特征在于，所述阴离子表面活性剂选自磺酸盐表面活性剂，磺酸盐表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、烷基萘磺酸钠、二烷基磺基琥珀酸钠、烷基二苯醚二磺酸钠中的一种及两种以上组合。

7.利要求5所述的一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试剂盒，其特征在于，所述非离子表面活性剂包括脱水山梨糖醇三油酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、去水山梨糖醇单月桂酸酯、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯、脂肪酸二乙醇酰胺中的一种及两种以上组合。

8.权利要求4～7任一项所述的一种犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试剂盒的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

S1、采用胶体金分别标记抗犬细小病毒单克隆抗体和犬冠状病毒单克隆抗体，得到所述胶体金标记的抗犬细小病毒和所述犬冠状病毒单克隆抗体；将所述胶体金标记的抗犬细小病毒和所述犬冠状病毒单克隆抗体分别混合，喷涂在所述金标垫上；

S2、将所述犬细小病毒多克隆抗体和犬冠状病毒多克隆抗体包被在硝酸纤维素膜上，形成检测线；将羊抗鼠IgG包被在位于所述检测线另一侧的所述硝酸纤维素膜上，形成质控线；干燥，制得设有所述检测线和所述质控线的所述硝酸纤维素膜；

S3、在底板上分别顺次搭接对应的所述样品垫、所述金标垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水纸，组成对应的板后，切成所述犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试纸条；

S4、将制得的所述犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试纸条装进所述塑料外壳中，调整所述犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试纸条的位置，使所述加样孔在所述样品垫上方，所述观察窗在所述检测线和所述质控线上方，即得所述犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测卡；

S5、将所述S4中制备的所述犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测卡和所述样本稀释液置于盒中，得到所述犬细小病毒和犬冠状病毒二联检测试剂盒。