[发明专利]一种构建ACPA阳性合并骨侵蚀类风湿关节炎动物模型的方法

权利要求书

1.一种构建ACPA阳性合并骨侵蚀类风湿关节炎动物模型的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

在动物模型构建周期内，每天在小鼠口腔牙龈区涂抹牙龈卟啉单胞菌混悬液；

将牛二型胶原蛋白溶液和完全弗氏佐剂等体积混合乳化成乳浊液，在所述动物模型构建周期内，在小鼠尾根部皮下注射所述乳浊液进行两次免疫，建模周期结束，得到所述的动物模型。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述牙龈卟啉单胞菌混悬液为将牙龈卟啉单胞菌悬浮于0.2％～2％的无菌羧甲基纤维素钠溶液中制备而成，所述牙龈卟啉单胞菌混悬液的含菌量为1.0～2.0×109CFU/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述牙龈卟啉单胞菌混悬液的涂抹剂量为50～200μL/只。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：对所述小鼠进行第一次所述乳浊液的免疫时间为建模开始后第0～15天，优选第7～15天；所述动物模型构建周期为6～9周。

5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于：所述两次免疫之间的时间间隔为7～21天。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法还包括在建模开始前采用抗生素对所述小鼠进行适应性饲养。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法还包括在建模过程中，检测所述小鼠血清中anti-CCP抗体的含量，检测所述小鼠炎症膝关节和脾脏组织中瓜氨酸蛋白含量与植物磷酸甘油酸脱氢酶含量的比值。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述anti-CCP抗体的含量高于阳性阈值，和/或所述瓜氨酸蛋白含量与植物磷酸甘油酸脱氢酶含量的比值为0.55～0.90；

所述阳性阈值参照临床标准确定，所述阳性阈值等于阴性样本anti-CCP抗体含量的平均值的3倍。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的方法，其特征在于：所述小鼠为C3H/He。

10.权利要求9所述的ACPA阳性合并骨侵蚀类风湿关节炎动物模型在筛选预防和治疗类风湿关节炎药物中的应用，其特征在于：

所述的ACPA阳性合并骨侵蚀类风湿关节炎动物模型的血清中anti-CCP抗体的含量高于阳性阈值，和/或所述瓜氨酸蛋白含量与植物磷酸甘油酸脱氢酶含量的比值为0.55～0.90；

所述阳性阈值参照临床标准确定，所述阳性阈值等于阴性样本anti-CCP抗体含量的平均值的3倍。