[发明专利]一种猫爪草提取物及其在癌症治疗中的应用

说明书

本发明公开一种猫爪草提取物及其在制备癌症治疗药物中的应用。所述猫爪草提取物中包含RTE的活性成分，主要作用靶点为AKT1、EGFR和HSP90AA1。本发明的猫爪草提取物的制备方法包括，将猫爪草粗粉用乙醇浸泡回流提取后，依次使用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，选择乙酸乙酯萃取物。基于网络药理学方法，确认猫爪草的RTE的活性成分中的抗癌活性靶点为AKT1、EGFR和HSP90AA1活性靶点。本发明的RTE具有抗食管鳞癌作用，因此具有较广的应用价值。

技术领域

本发明涉及植物提取物领域，具体涉及猫爪草提取物，更具体地，提供以AKT1、HSP90AA1、EGFR为抗癌主要作用靶点的猫爪草提取物及其用途。

背景技术

癌症是现今威胁人类健康的头号杀手，2020年全球有一千多万人死于癌症。癌症具有细胞分化和增殖异常、生长失去控制、浸润性和转移性等生物学特征，其发生是一个多因子、多步骤的复杂过程，分为致癌、促癌、演进三个过程，与吸烟、感染、职业暴露、环境污染、不合理膳食、遗传因素密切相关。目前的治疗方法中，对于早期或较早期实体肿瘤来说，手术切除仍然是首选的治疗方法，其次还包括化学治疗、放射线治疗等治疗方法，上述治疗方法具有较好的效果，但对患者身体素质具有一定的要求，其具有一定的承受力，能够承受上述治疗手段所带来的较大的生理病痛。中医药作为一种补充和替代药物，由于具有低副作用的优势，配合手术、放化疗可以减轻放化疗的毒副作用，促进患者恢复，增强对放化疗的耐受力，被广泛与抗肿瘤药物一起用于治疗各种形式的癌症。

猫爪草(学名：Ranunculus ternatusThunb.)是毛茛科，毛茛属一年生草本植物，主要分布于中国河南和安徽地区，中性植物，喜光，也耐阴，喜温暖湿润气候，生于丘陵、旱坡、田埂、路旁、荒地阴湿处，适应性强。对土壤要求不严，宜生长于疏松、适湿、肥沃的腐殖质壤土栽培，较耐水湿。猫爪草性温，味甘、辛，入肝、肺经，具有清热解毒、消肿散结、止咳祛痰等功效，临床用于治疗肺结核、淋巴结结核、咽喉炎、疟疾及各种癌症，但它们的活性成分和潜在作用靶点仍不清楚。

发明内容

针对猫爪草提取物在癌症治疗中的活性成分不明确、潜在作用靶点不清楚的问题，本发明通过网络药理学方法探讨RTE潜在作用靶点及诱导癌细胞凋亡的机制，并使用不同的溶剂萃取获得猫爪草醇提物不同部位，通过试验对猫爪草石油醚部位(R.ternatuspetroleum ether extract，RTP)和乙酸乙酯部位(R.ternatus ethylacetate extract，RTE)的抑制癌细胞增殖的作用加以证实。

本发明提供一种猫爪草提取物，其制备方法包括如下步骤：

步骤a：将猫爪草粗粉按比例加入乙醇浸泡、回流提取后过滤，重复提取多次后，合并滤液，减压浓缩至无乙醇味，得浓缩液；

步骤b：在浓缩液中加入超纯水溶解，依次加入石油醚、乙酸乙酯和正丁醇静置过夜，待分层后进行萃取，萃取一定次数后旋干、预冻，真空冷冻干燥后得到猫爪草醇提物不同部位(猫爪草石油醚部位、猫爪草乙酸乙酯部位和猫爪草正丁醇部位)后密封保存。

进一步的，所述步骤a中使用的乙醇是95％乙醇，所述猫爪草粗粉与乙醇的质量比为1:5-1:10，优选的，为1:10；所述浸泡、回流时间为1-3小时，优选的，所述浸泡时间为1小时，所述回流时间为3小时；所述重复提取次数为1-3次，优选的，为3次。

进一步的，所述步骤b中使用的超纯水与浓缩液的体积比为1:1-1:5，优选的，为1:1；所述萃取次数为3-5次，优选的，为3次；所述预冻的温度在-80℃，预冻时间为6-18h，优选的，为12h；所述真空冷冻干燥时间为24-72h，优选的为48h。

进一步的，使用时，将猫爪草醇提物不同部位加入DMSO，超声至完全溶解并定容为1ml，存于4℃备用。