[发明专利]外周血单个核细胞长期保存方法

权利要求书

1.一种外周血单个核细胞保存方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将外周血单个核细胞混悬液与细胞冻存液混合；和(2)进行程序降温至-70至-90℃，然后转移至液氮中冷冻保存；其中，所述细胞冻存液为不含有DMSO、人白介素和白蛋白的细胞冻存液；所述细胞冻存液含有聚乙二醇、银杏叶多糖和基础培养基；所述聚乙二醇的含量为0.05-0.3g/mL，银杏叶多糖的含量为0.05-0.1g/mL，基础培养基为99体积％。

2.根据权利要求1所述的方法，所述聚乙二醇的含量为0.08-0.12g/mL，银杏叶多糖的含量为0.08-0.12g/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，所述聚乙二醇的平均分子量为500-3000。

4.根据权利要求1所述的方法，所述聚乙二醇的平均分子量为1800-2200。

5.根据权利要求1所述的方法，所述细胞冻存液的基础培养基为无血清培养基。

6.根据权利要求5所述的方法，所述细胞冻存液的基础培养基为DMEM/F12培养基。

7.根据权利要求1所述的方法，所述用于程序降温的外周血单个核细胞的浓度为0.8-1.2×10⁶个/mL。

8.根据权利要求1所述的方法，所述外周血单个核细胞在液氮中保存12个月的情况下，其复苏细胞存活率达95％以上。

9.根据权利要求1所述的方法，所述外周血单个核细胞在液氮中保存12个月的情况下，其复苏细胞存活率达为98％以上。