[发明专利]抗体和间充质干细胞外泌体制备方法以及联合治疗疾病的用途

说明书

本申请提供了一种用于治疗炎症性肠病的药物组合物及其应用，所述药物组合物包括细胞外泌体和抗IL‑17抗体，所述细胞外泌体为经过TGF‑β、IL‑2、IGF‑1、bFGF诱导的干细胞外泌体。采用干细胞外泌体与抗IL‑17抗体相结合治疗IBD，可明显缓解IBD症状，维持体内免疫环境稳定；选用具有中等亲合能力的抗IL‑17抗体，既能够抑制过渡的免疫应激反应，又可保持机体正常的生理功能，防止IBD症状恶化；选用脐带间充质干细胞来源的外泌体，克服伦理风险，来源稳定而广泛，有利于临床大规模应用；所述脐带间充质干细胞经过多种免疫因子诱导后产生的外泌体，可显著改善促结肠粘膜上皮细胞增殖能力，有效对抗氧化应激，维持消化道正常生理功能。

技术领域：

本发明属于药物研究领域，具体提供了一种抗体和间充质干细胞外泌体制备方法以及联合治疗疾病的用途。

背景技术：

炎症性肠病(Inflammatory bowel disease，IBD)是一种长期复发的炎症性疾病，影响胃肠道的各个部位，IBD世界各地广泛分布，全球约有500万患者，且近年来该病的年轻人患病率显着增加。IBD包括两种常见的疾病，即克罗恩病(Crohn's disease，CD)和溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)，二者具有相同的临床过程，差异仅限于发炎病变的部位和性质不同，克罗恩病是一种影响整个肠壁的透壁疾病，它可以间歇性地涉及肠道的任何部分，但大多数病例主要局限于小肠的远端；溃疡性结肠炎主要是一种结肠疾病，它从直肠连续延伸到大肠的近端，与CD不同，UC病变通常局限于上皮黏膜。

临床上，IBD表现出多种临床症状，包括腹部不适、腹泻、血便、发烧、疲劳和体重减轻等等，除了上述经常报道的症状外，IBD患者还经常表现出肠外并发症，可能涉及皮肤病(结节性红斑和坏疽性脓皮病)、眼部疾病(结膜炎、葡萄膜炎)、风湿性疾病(强直性脊柱炎和外周关节炎)、肝胆疾病(原发性硬化胆管炎)和泌尿系统疾病(肾结石)等等，上述症状及其并发症严重影响患者生活质量，也造成了很大的经济负担。

IBD的确切发病机理尚不明确，常被认为是遗传易感个体中针对内源性微生物的持续炎症过程的结果。这种疾病被证明是一种遗传疾病，双胞胎研究表明IBD的发生率一致，尤其是在同卵双胞胎中，同样多达25％至30％的病例存在阳性家族史。除了遗传因素外，IBD还由各种环境因素介导，包括吸烟、压力、口服避孕药、非甾体抗炎药(NSAID)、维生素D缺乏、污染、饮食和早期抗生素使用等等。还有报道称，肠道微生物组对于IBD的发展显然是必不可少的，微生物多样性较少者易患该疾病，在这种情况下，肠道微生物组成的剧烈变化与IBD易感性增加有关。也有人将IBD归因于肠道上皮细胞水平的免疫反应失调引发的一种不受控制的炎症状态，它的出现是由于各种促炎途径的上调和几种调节途径的平行下调，首先可以归因于肠道屏障的完整性受损，其次腔内病原体向肠壁的扩散使先天免疫细胞无法识别并最终消除入侵细菌，IL-1、IL-6、IL-12、IL-23和TNF-α等强效炎症分子的表达增加，导致微生物制剂的延迟清除和随后的过度炎症反应。

IBD的治疗手段已经取得了一定进步，对于轻度IBD，以美沙拉嗪为代表的氨基水杨酸盐类药物为首选治疗药物，美沙拉嗪通过直肠给药缓解UC或CD症状；对于美斯卡林耐药的中度疾病患者，口服糖皮质激素或免疫调节剂如TNF-α单克隆抗体(英夫利昔单抗)成为一种普遍的治疗方案；类固醇药物，如布地奈德，也是一种可选的治疗药物，但长期服用易产生全身性不良反应，故通常需在6周内截断类固醇药物。除药物治疗外，手术疗法也是常规的治疗手段，严重瘘管病患者施以分流造口术，UC重度患者施以全结肠切除术，但手术疗法造成了严重的经济负担和生活不便，同时还伴有复发风险。因此，临床上迫切需要开发新型治疗药物或治疗技术，以便有效而长期缓解IBD症状。IBD疗法的主要作用机理为纠正免疫失调并抑制肠粘膜内的炎症反应，而细胞外泌体是近年来细胞生物学中的研究热点之一，该类物质能够通过多种途径参与机体免疫调节，因而成为了IBD治疗领域新的突破口。