[发明专利]一种辅助生殖用洗精受精液

说明书

本发明属于辅助生殖领域，公开了一种辅助生殖用洗精受精液，作为体外受精培养药剂，包括：基础培养物料，用于搭建体外受精人工控制的体液环境；以及连翘酯苷A和磷脂酰丝氨酸；其中，连翘酯苷A能够清除活性氧，降低活性氧对精子和卵细胞的损害，还能提高精子活力，添加量为基于培养液总体积的1‑100mg/L；而磷脂酰丝氨酸在受精过程中，能促进精子的顶体反应，辅助精子进行顶体反应中的膜融合，从而提高受精率，添加量为基于培养液总体积的1‑100mg/L。两种物料具有显著的协同效果。本发明提供的体外受精培养液，可以提供稳定的受精环境，减少活性氧对精子和卵子的伤害，还能提高精子活力，促进精卵结合，从而提高受精率和囊胚形成率。

技术领域

本发明属于辅助生殖技术领域，具体涉及一种辅助生殖用洗精受精液。

背景技术

体外受精是指人的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术，英文简称为IVF。精子和卵子在体外受精，需要受精培养液提供稳定的受精环境。精子和卵子在体外培养过程中产生过量的活性氧，不利于体外受精。

现有研究中发现，将小鼠受精卵暴露于21％含氧量的大气中，胚胎不能发育到4-细胞阶段或者严重发育滞后。过量的活性氧将破坏精子、卵细胞的细胞膜，引起脂质膜过氧化损伤，使负责跨膜信号传导的磷脂依赖性的蛋白激酶C迅速耗竭，影响信号传递。损坏DNA，损伤线粒体，影响精子活性，破坏精子功能。不利于获得正常的受精卵以及囊胚期的培养。

在辅助生殖技术中需采集良好的精子和母体的卵细胞进行受精和先期培养，该培养过程与受精液密切相关，因此体外受精液是否能够提供稳定的受精环境，营养物质将影响到精子、卵子是否能够正常结合，得到受精卵。目前使用的受精液调配的营养不全，或其物理或化学指标过余宽，在培养过程中容易使精子或卵细胞死亡、或精子获能不足活力较低、或卵细胞生存受到影响。有些受精液的稠度较高，稳定性差，有害成份去除不干净，严重影响受精卵的形成、发育和成长。且由于体外受精过程中会产生一定量的活性氧，普通的受精液、洗精液无法有效去除活性氧，则导致现有体外受精过程中始终存在一定的影响。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供一种体外受精培养液，能够可以提供稳定的受精环境，还通过特殊的添加物来减少活性氧对精子和卵子的伤害，促进精卵结合，从而提高受精率和囊胚形成率.

本发明所采用的技术方案为：

第一方面，本发明提供一种辅助生殖用洗精受精液，作为体外受精培养药剂，包括：

基础培养物料，用于搭建体外受精人工控制的体液环境；

以及连翘酯苷A和磷脂酰丝氨酸；

其中，连翘酯苷A的添加量为基于培养液总体积的1-100mg/L，而磷脂酰丝氨酸的添加量为基于培养液总体积的1-75mg/L。

其中连翘酯苷A能够清除过量活性氧对精子和卵细胞DNA带来的损伤，保护负责跨膜信号转导的蛋白激酶C。而磷脂酰丝氨酸有着能够促进精子膜、精子、卵细胞内线粒体膜流动，作为辅酶因子激活细胞膜上蛋白激酶C。

由于在受精过程中，精子顶体反应与磷脂酶A2被激活有关，天然激动剂受蛋白激酶C信号通路的调节，最终激活磷脂酶A2，引起胞外Ca²⁺内流，将磷脂水解为花生四烯酸和溶血磷脂酰胆碱，从而促进膜的融合即顶体反应。但磷脂酶A2含量过高也可能导致精子自发性顶体反应的发生，反而不利于整个受精过程，导致受精能力下降。

结合第一方面，本发明提供第一方面的第一种实施方式，所述连翘酯苷A的添加量为基于培养液总体积的25-75mg/L。

结合第一方面，本发明提供第一方面的第二种实施方式，所述连翘酯苷A的添加量为基于培养液总体积的25、50或75mg/L。