[发明专利]一种具有高热稳定性的PET水解酶IsPETase-cSP突变酶及编码基因及工程菌在审
| 申请号： | 202210875888.8 | 申请日： | 2022-07-25 |
| 公开（公告）号： | CN116179508A | 公开（公告）日： | 2023-05-30 |
| 发明（设计）人： | 齐崴;尤生萍;殷庆典;苏荣欣 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N9/18 | 分类号： | C12N9/18;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C08J11/10;C08L67/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 具有 高热 稳定性 pet 水解 ispetase csp 突变 编码 基因 工程 | ||
【权利要求书】：
1.一种具有高热稳定性的PET水解酶IsPETase-cSP突变酶，命名为IsPETaseS92P/D157A-cSP，其特征在于所述IsPETaseS92P/D157A-cSP的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.编码具有高热稳定性的PET水解酶IsPETase-cSP突变酶的基因，其特征是所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.含有权利要求2所述基因的重组质粒pET-22b-IsPETaseS92P/D157A-cSP。
4.含有权利要求3所述重组质粒的工程菌BL21(DE3)/pET-22b-IsPETaseS92P/D157A-cSP。
5.权利要求1的一种具有高热稳定性的PET水解酶IsPETase-cSP突变酶在水解PET中的应用；PET为聚对苯二甲酸乙二醇酯的简写。
6.根据权利要求5所述应用，其特征是包括如下步骤：
向pH值为8.5～9.5的50mM甘氨酸-NaOH缓冲液中加入PET使终浓度为60～100mg/mL；加入IsPETaseS92P/D157A-cSP使终浓度为400～600nM；在30～45℃，50～220rpm条件下孵育1～3天。
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