[发明专利]一种利用巨菌草制备野芝麻新甙的方法

说明书

本发明提供了一种利用巨菌草制备野芝麻新甙的方法，包括如下步骤：S1、将巨菌草烘干，粉碎，得到巨菌草颗粒；S2、向巨菌草颗粒中加入乙醇，浸泡，过滤；滤液减压浓缩；S3、向步骤S2得到的提取物中加入正丁醇，反复萃取2‑4次，收集后萃取液，于40℃真空旋转浓缩至粘稠状样品；S4、取步骤S3所得的少量粘稠状样品进行TLC分析；S5、将样品溶于甲醇后，加入硅胶，作为干法上样的硅胶样品；S6、将步骤S5所得的硅胶样品用洗脱剂洗脱；S7、HPLC分析与制备野芝麻新甙；该方法以巨菌草为原料，能够将巨菌草中的野芝麻新甙提取出来，得率≥0.004g/Kg，制得的野芝麻新甙纯度高≥85％。

技术领域

本发明涉及巨菌草技术领域，尤其是涉及一种利用巨菌草制备野芝麻新甙的方法。

背景技术

野芝麻新甙是环烯醚萜苷类化合物。环烯醚萜苷类化合物以游离或结合状态存在存在于双子叶植物中，如茜草科、鹿蹄草科、水晶兰科、玄参科、唇形科、龙胆科和木犀科等植物。该类化合物具有广泛的生物活性，具有抗病毒、消炎、抗氧化、抗肿瘤、抗菌、助消化、增强免疫等功能。。

巨菌草是系多年生禾本科直立丛生型植物，根系发达，生长迅速，已知其富含有机酸、多酚类、蛋白质、纤维素、糖类等生物物质。巨菌草适应能力强，在我国各地区被广泛种植。目前巨菌草多用于饲料、沼气发酵生产、燃烧发电、生物质乙醇制造等传统领域上，缺乏从巨菌草中提取生物活性物质的技术途径。

目前，还未见过利用巨菌草制备野芝麻新甙的报道。因此，从巨菌草中分离提取以野芝麻新甙为主的环烯醚萜苷类化合物，不仅能够丰富野芝麻新甙的来源，而且对于巨菌草的高附加值利用具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种利用巨菌草制备野芝麻新甙的方法。该方法以巨菌草为原料，能够将巨菌草中的野芝麻新甙提取出来，得率≥0.004g/Kg，制得的野芝麻新甙纯度高≥85％，提高了巨菌草的高价值化利用。

为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：

一种利用巨菌草制备野芝麻新甙的方法，包括如下步骤：

S1、将巨菌草烘干，用粉碎机将巨菌草粉碎，得到巨菌草颗粒；

S2、向巨菌草颗粒中加入乙醇，室温下浸泡6-8天，过滤后获得滤液；滤液减压浓缩后除去乙醇，获得绿色水溶性提取物；再重复提取1-2次，将提取物合并；

S3、向步骤S2得到的提取物中加入正丁醇，反复萃取2-4次，收集后萃取液，于40℃真空旋转浓缩至粘稠状样品；

S4、取步骤S3所得的少量粘稠状样品进行TLC分析，用展开剂在玻璃板上展开，然后滴加10％硫酸乙醇溶液进行显色，点样后，观察是否有某个点的物质移动的相对距离与野芝麻新甙标准品一致；如果有，进行下一步；

S5、将步骤S3所得的粘稠状样品溶于甲醇后，加入硅胶，待溶剂自然挥发后作为干法上样的硅胶样品；

S6、将步骤S5所得的硅胶样品用氯仿搅拌后装柱，待硅胶沉降完全后上样并用洗脱剂洗脱；收集与野芝麻新甙标准品移动距离一致的组分；

S7、HPLC分析与制备野芝麻新甙，

色谱柱：Welch Ultimate XB-C₁₈ column(250mm×4.6mm i.d.,5μm)，波长232nm，洗脱条件：0min，10％甲醇；20min，50％甲醇；25min，100％甲醇，30min，100％甲醇，35min，10％甲醇；流速1ml/min，柱温35℃；收集野芝麻新甙组分，于40℃真空旋转浓缩至粘稠状后，加入水溶解，冷冻干燥为野芝麻新甙粉末。

作为优选的实施方式，步骤S1中，所述巨菌草颗粒目数为20-40目。

作为优选的实施方式，步骤S2中，所述乙醇为65-75wt％乙醇。