[发明专利]一种益生菌和噬菌体的组合物及其应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，具体提供了一种益生菌和噬菌体的组合物及其应用，所述益生菌和噬菌体的组合物包括：溶藻弧菌VA3、Halocynthiibacter、Psychrobacter、Ruegeria中的至少一种和噬菌体VpC‑1；其中，所述溶藻弧菌VA3的保藏编号为CCTCC NO:M 20211703，分类命名为Vibrio alginolyticus；所述噬菌体VpC‑1的保藏编号为CCTCC NO:M20211704，分类命名为Myoviridae。益生菌组合物从对虾肠道中筛选，解决了益生菌对水产环境的不耐性，当选择多菌株进行组合制备复合益生菌制剂时，可以增加菌群的多样性，有助于水产动物肠道的菌群稳定，使菌群保持一个稳定的健康状态，提高非特异性免疫能力，噬菌体能靶向杀灭目标弧菌，两者联合应用对弧菌引起的鱼虾类疾病产生预防效果。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种益生菌和噬菌体的组合物及其应用。

背景技术

我国是水产养殖大国。近年来，我国的水产养殖业获得迅猛发展。随着海水养殖规模的日益扩大和集约化养殖方式的不断推广，疾病的频繁发生对水产规模化养殖的健康发展造成了严重的威胁。水产养殖的病原体主要包括细菌、病毒、寄生虫等，其中细菌性疾病是对危害程度较为严重的一类疾病。

弧菌是能运动的芽孢短杆状细菌，广泛分布于近海岸、河口海区海水及生物体内，是海洋中最常见的细菌类群之一，同时也是引起海水养殖鱼虾细菌性疾病最重要的病原菌。弧菌的致病强度与宿主的生理状态及水质环境条件等综合因素有关，属于条件性致病菌，其主要通过口或伤口感染，产生毒素，致使伤口肌肉溃烂化脓以及内脏器官的严重病变从而导致鱼虾类的死亡。由弧菌引起的疾病又称弧菌病，具有“流行面积广、发病率高、致死性强”等特点，是水产养殖动物的主要疾病，同时也被确定为是阻碍水产养殖业发展的重要限制性因素，给养殖业造成了巨大的危害。其中鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)和杀鲑弧菌(Vibrio salmonicida) 等弧菌引起的弧菌病被认为是鱼虾类养殖中最为严重的病害之一。早期死亡综合征，也称作肝胰腺急性坏死综合征影响的主要对虾种类包括凡纳滨对虾、斑节对虾和中国明对虾在内的多个主养品种，其中凡纳滨对虾和斑节对虾的死亡率最高。由于该病发病急、造成的死亡率高、流行范围广，对对虾养殖业危害严重，备受关注。亚利桑那大学的研究已经确定，该疾病是由细菌剂副溶血弧菌引起的，副溶血弧菌通过口腔传播并定殖于虾的胃肠道，并产生毒力蛋白，导致虾消化器官的组织破坏和功能障碍。

目前针对水产养殖相关动物疾病的预防和控制方法主要以化学抗生素法和免疫疫苗法，其中以化学抗生素使用为主。作为当前控制水产动物疾病的主要手段，化学抗生素法具有使用方便、见效快和疗效好等优点。但是，大批量频繁使用抗生素在控制病原菌的同时，极大了助长了病原菌的耐药性，并加速了广谱耐药菌的产生。这使得致病菌的耐药性问题日益严重。此外，化学药物残留也是导致人类食源性疾病产生的重要原因之一，对人类健康造成严重危害。

益生菌可在水产动物肠道或水产环境中对有害菌进行竞争性抑制，减少弧菌的浓度，使其低于发病浓度。近年来抗生素的滥用使得益生菌的优势一直未能完全发挥。由于抗生素对细菌抑制的非特异性，有害菌在被大量清除的同时，有益菌也被抗生素杀灭，从而无法发挥益生菌的作用。现在大众逐渐了解到抗生素滥用的危害，开始寻找能够取代抗生素的抑菌和杀菌药物，益生菌就是其中一个有效措施。然而，传统益生菌例如乳酸菌、芽孢杆菌，在水产养殖上的使用效果并不理想，这些益生菌并不能适应水产养殖的环境，例如过低的温度(＜37℃)，过高的含盐度(～30％)。为了解决这个问题，本发明从对虾肠道中筛选出能有效提高对虾存活率的益生菌。