[发明专利]黄颡鱼源拟态弧菌及其在制备拟态弧菌灭活疫苗中的应用

说明书

本发明公开了一种黄颡鱼源拟态弧菌及其在制备拟态弧菌灭活疫苗中的应用，属于生物疫苗技术领域。本发明公开了一种黄颡鱼源拟态弧菌Hsy0531‑K，其已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO:M 2022698，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏日期为2022年5月23日。该菌株是从患病黄颡鱼中分离获得，与其他拟态弧菌菌株相比，具有最强毒力和最高免疫原性，可作为疫苗毒种，将其灭活制备得到的疫苗浸泡免疫黄颡鱼，攻毒后，能使黄颡鱼获得86％的相对保护率。同时该疫苗具有易于大规模生产、安全、免疫方式简便等优点，为黄颡鱼溃疡病的免疫预防提供一种新的切实有效的预防措施。

技术领域

本发明涉及生物疫苗技术领域，特别是涉及一种黄颡鱼源拟态弧菌及其在制备拟态弧菌灭活疫苗中的应用。

背景技术

黄颡鱼(Yellow catfish，Pelteobagrus fulvidraco)是我国长江中下游地区一种重要的经济养殖品种。黄颡鱼溃疡病是由拟态弧菌(Vibrio mimicus)引起的以体表溃烂为主要特征的传染性疾病，溃疡病灶呈规则的长方形，通常出现在鱼体的尾部、背腹部，单处发病面积较大，病灶边缘界限清晰，常伴随1条很窄的红色出血带。严重时皮肤剥落，肌肉溃烂，鱼鳔及内脏裸露，鱼体衰竭而亡。2011年，黄颡鱼溃疡病首先暴发于广东和广西两省，随后在四川、湖北、浙江、湖南、江西等多地发生或流行，病害流行时间为4～10月，其中6～8月为高发期，各种规格的黄颡鱼均可发病，成鱼期发病率高于幼鱼期，发病率30％左右，发病池塘的感染率约80％，感染后的死亡率达70％～100％。近年来该病在黄颡鱼主养区大面积暴发流行，给养殖户造成了巨大经济损失。目前对于黄颡鱼溃疡病的治疗，主要采用恩诺沙星和强力霉素等抗菌药物，但由于黄颡鱼感染发病后，摄食量明显降低，治疗效果不甚理想，病势较急的，根本来不及治疗，此外还可能会造成药物残留，影响上市黄颡鱼的食品质量安全。因此要从根本上控制本病的传播，必须采取切实有效的预防措施。

对拟态弧菌疫苗的研究有很多。例如，李瑾年等研制的亚单位疫苗-拟态弧菌OmpU蛋白B细胞抗原多表位串联肽、口服靶向表位基因疫苗及菌影疫苗等，吴后波等研发的拟态弧菌减毒活疫苗，这些疫苗对拟态弧菌的感染均有较好的免疫保护效果。但考虑到减毒活疫苗和菌影疫苗仍有一定的安全风险；亚单位疫苗则制备繁琐，难以批量生产；核酸疫苗同样不易于大量制备且免疫方式不适用鱼类的大规模免疫。而全菌体灭活疫苗具有制备简易、安全性高、免疫原性强等诸多优势，因此，仍有大量科研人员在鱼用疫苗的制备领域，进行相关研究和报道，如：劳国锋研究了拟态弧菌全菌灭活疫苗对黄颡鱼的免疫保护效果，该疫苗采用注射接种能使黄颡鱼获得显著的抗拟态弧菌免疫保护力，而选择浸泡接种方式不能产生有效的免疫保护力。但是注射接种方式会造成工作量增加，耗费大量时间人力成本，并且注射免疫也会造成鱼体损伤，对接种对象刺激较大，不利于应用于实际生产实践中。而浸泡免疫相比于注射免疫具有工作量小，对接种对象刺激小等优势，但是其免疫效果往往较注射免疫差，其免疫保护力难以超过60％，使得浸泡免疫手段未能在生产实践中得到推广。因此，本发明拟筛选获得一株毒力及免疫原性强的菌株，使其制备的灭活疫苗可通过浸泡免疫接种方式获得较高的免疫保护力，为鱼类疾病的免疫预防提供技术指导。

发明内容

本发明的目的是提供一种黄颡鱼源拟态弧菌及其在制备拟态弧菌灭活疫苗中的应用，以解决上述现有技术存在的问题，该疫苗浸泡免疫黄颡鱼，能使其获得86％的相对保护率，为黄颡鱼溃疡病的免疫预防提供一种新的切实有效的预防措施。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种黄颡鱼源拟态弧菌(Vibrio mimicus)Hsy0531-K，其已在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO:M 2022698，保藏地址为中国武汉武汉大学，保藏日期为2022年5月23日。

本发明还提供上述的黄颡鱼源拟态弧菌Hsy0531-K在制备黄颡鱼拟态弧菌灭活疫苗中的应用。