[发明专利]一种利用Lbcpf1变体构建的植物胞嘧啶碱基编辑系统及其应用

权利要求书

1.一种利用Lbcpf1变体构建的植物胞嘧啶碱基编辑系统，其特征在于，所述胞嘧啶碱基编辑系统包括第一表达盒和第二表达盒

其中，所述第一表达盒为向导RNA表达盒，具有式I结构：P1-A-B-T（I）；其中，

（a）P1为第1启动子；

（b）A为对应于成熟型直接重复序列(direct repeat, DR)

（c）B为目标位点引导序列sg；

（d）T为终止序列，

所述第二表达盒为dLbcpf1-A3Bctd融合蛋白表达盒，所述dLbcpf1-A3Bctd融合蛋白具有式II结构：P2-C-D-E-F-G-H-I-J-K（II）；其中，

（a）P2为第2启动子；

（b）C为无或核定位信号序列NLS；

（c）D为胞嘧啶脱氨酶A3Bctd基因序列；

（d）E为任意的连接肽或连接序列；

（e）F为单链DNA结合蛋白ssDBD基因序列；

（f）G为任意的连接肽或连接序列；

（g）H为Lbcpf1变体dLbcpf1的基因序列；

（h）I为无或核定位信号序列NLS；

（i）J为3个拷贝的尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂基因序列；

（j）K为终止子；

其中，C和I至多一个为无，所述Lbcpf1变体dLbcpf1的DNA切割活性缺失，由序列表中SEQ ID NO:1 所示的核苷酸序列构成，所述单链DNA结合蛋白ssDBD由序列表中SEQ ID NO:2 所示的核苷酸序列构成，所述胞嘧啶脱氨酶A3Bctd基因，由序列表中SEQ ID NO:3 所示的核苷酸序列构成。

2.根据权利要求1所述的植物胞嘧啶碱基编辑系统，其特征在于，P1启动子包括35S-CmYL-U6复合启动子、TaU3p、OsU3p、TaU6p或OsU6p启动子。

3.根据权利要求1所述的植物胞嘧啶碱基编辑系统，其特征在于，所述的第一表达盒和第二表达盒位于同一表达载体上。

4.一种权利要求1-3之一所述的植物胞嘧啶碱基编辑系统的应用，其特征在于，所述应用为：利用所述植物胞嘧啶碱基编辑系统，实现对水稻基因组的碱基编辑，从而获得含有碱基突变的转基因植物。