[发明专利]siRNA分子组合物及其应用

说明书

本发明涉及一种siRNA分子组合物及其应用。该siRNA分子组合物序列为：正义链：5’‑AGCCGTACATTGCTATCGA‑3’，反义链：5’‑TCGATAGCAATGTACGGCT‑3’。该siRNA分子组合物，可以用于制备抑制USP11表达的试剂，以及用于制备治疗瘢痕疙瘩的药物，该siRNA分子组合物以USP11作为瘢痕疙瘩的生物标志物，通过靶向特异抑制瘢痕疙瘩中高表达的USP11，抑制成纤维细胞合成分泌I型胶原细胞外基质和III型胶原细胞外基质，以及控制USP11所调控的下游靶基因，达到控制和治疗瘢痕疙瘩的目标。

技术领域

本发明涉及药物用途技术领域，尤其涉及一种siRNA分子组合物及其应用。

背景技术

瘢痕疙瘩是高于皮肤表面，超过伤口边缘，且持续性增生的异常瘢痕，一般不能自行消退。瘢痕疙瘩不仅影响美观，还可能伴有瘙痒、疼痛等症状，长期会对患者的心理和生理均造成较大负面影响。瘢痕疙瘩的发生继发于皮肤损伤，以持续的炎症反应和胶原异常过度沉积为特征，病变范围逐渐扩大，侵犯周围正常皮肤。其发生率从4.5％到16％均有报道，且在有色人种中更高。瘢痕疙瘩的发生可能与生长因子失衡、胶原代谢异常、遗传因素、免疫功能失调、皮脂反应、局部张力异常等许多因素相关，目前还没有假说可以完全解释其成因。瘢痕疙瘩的治疗有手术切除、皮质醇注射、放射治疗、激光、硅凝胶、压力治疗、减张治疗、脂肪移植等许多种，但由于病因不清，无法对因治疗，因此较易复发而导致疗效不佳。

成纤维细胞在瘢痕疙瘩的发生、发展中起重要作用。瘢痕疙瘩中的成纤维细胞在TGF-β等因子的刺激下被过度激活，增殖并分泌胶原。一部分成纤维细胞分化为具有收缩功能的肌成纤维细胞，在瘢痕疙瘩中数量增加。上皮-间质转化也参与了瘢痕疙瘩的形成。TGF-β1和Notch-1介导的信号通路在成纤维细胞的激活中十分重要。多种炎症细胞及细胞因子参与了瘢痕疙瘩的发病，成纤维细胞、免疫细胞等之间的相互作用可能是瘢痕疙瘩发病过程中重要的一环。

泛素化作为一种重要蛋白质翻译后修饰，参与调控细胞周期、细胞凋亡、DNA修复、抗原呈递、受体内吞、细胞内信号转导等生物学过程，对维持细胞稳态具有重要意义。近期研究发现由去泛素化酶(deubiquitinating enzymes,DUBs)所介导的去泛素化作为泛素化的逆过程在调节细胞内信号转导同样扮演重要角色，其能切断底物蛋白与泛素分子之间的连接，将泛素分子从泛素化底物蛋白中解离出来，游离的泛素分子重新进入蛋白质调节循环中。基于基因序列和结构域保守性，DUBs可以分为以下六个亚类：泛素特异性蛋白酶(ubiquitin-specific proteases，USPs)、泛素羧基末端水解酶(ubiquitin carboxyterminal hydrolases,UCHs)、卵巢肿瘤相关蛋白酶(ovarian tumor-related proteases,OTUs)、MJD结构域蛋白酶(Machado-Joseph disease protein domain proteases，MJDs)、JAMM/MPN域相关金属蛋白酶(JAMM/MPN domain-associated metallopeptidases,JAMMs)以及近期发现的单核细胞趋化蛋白诱导的蛋白质(monocyte chemotactic proteininduced protein，MCPIP)。泛素特异性蛋白酶(USPs)是DUBs家族最大的亚族，包括60多种成员。USPs通过去泛素化作用抑制靶蛋白依赖泛素-蛋白酶体通路的降解或者调节靶蛋白的定位和活性。多项研究报道USPs家族成员可通过去泛素化调节TGF-β/Smad信号通路相关蛋白水平参与纤维化疾病的发生发展。现有研究证据表明USPs在纤维化疾病中存在异常活化，其在调控TGF-β/Smad信号通路转导活性方面发挥关键作用。