[发明专利]一种含有人参皂苷的成体干细胞的低温保存溶液在审
申请号: | 202210925533.5 | 申请日: | 2022-08-03 |
公开(公告)号: | CN115119831A | 公开(公告)日: | 2022-09-30 |
发明(设计)人: | 徐驰;陶勇;王丽苹;赵金凤;欧政威 | 申请(专利权)人: | 深圳知因细胞生物科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 深圳市世纪宏博知识产权代理事务所(普通合伙) 44806 | 代理人: | 董博 |
地址: | 518000 广东省深圳市海山街道田东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 含有 人参 皂苷 成体 干细胞 低温 保存 溶液 | ||
本申请公开了一种含有人参皂苷的成体干细胞的低温保存溶液。本申请的含有人参皂苷的成体干细胞的低温保存溶液,由成体干细胞自身物种来源的血清、DMEM/F‑12培养液、二甲基亚砜和人参皂苷组成;其中,血清和DMEM/F‑12培养液的体积比为1:1,二甲基亚砜的浓度为5‑15%,人参皂苷的浓度为5‑15μg/mL。本申请的成体干细胞低温保存溶液,通过组分和配方优化,能够减少成体干细胞冻存时的损伤,提高细胞复苏的成活率,为成体干细胞冻存提供了一种新的方案。
技术领域
本申请涉及成体干细胞保存技术领域,特别是涉及一种含有人参皂苷的成体干细胞的低温保存溶液。
背景技术
成体干细胞是指存在于各种分化组织中,具有自我更新、高度增值和多向分化潜能的尚未分化的干细胞。成体干细胞普遍采用低温保存,即分散于保存液中,在保存液的保护下进行低温冻存。
现有的成体干细胞低温保存液主要由二甲基亚砜和血清组成,虽然能够长期冻存;但是,一方面,二甲基亚砜本身对细胞具有损伤,长期冻存这种损伤作用会增强;另一方面,现有的保存液保存后,复苏过程中会导致干细胞损伤和分化潜能降低。
因此,如何避免或进一步减少低温冻存对成体干细胞的损伤,是本领域的研究重点。
发明内容
本申请的目的是提供一种新的含有人参皂苷的成体干细胞的低温保存溶液。
本申请采用了以下技术方案:
本申请公开了一种含有人参皂苷的成体干细胞的低温保存溶液,由成体干细胞自身物种来源的血清、DMEM/F-12培养液、二甲基亚砜和人参皂苷组成;血清和DMEM/F-12培养液的体积比为1:1,二甲基亚砜的浓度为5-8%,人参皂苷的浓度为5-15μg/mL。
需要说明的是,本申请的血清是取自成体干细胞物种来源的血清,优选同一个体来源的血清,能够更好的对成体干细胞进行保护;并且,本申请降低了二甲基亚砜的用量,通过血清、DMEM/F-12培养液、二甲基亚砜和人参皂苷的有机组合,能够最大程度的减少冻存和复苏过程中成体干细胞的损伤。
优选的,人参皂苷为人参皂苷Rh1、人参皂苷aPPD和人参皂苷Rc中的至少一种。
优选的,本申请的低温保存溶液中,人参皂苷由人参皂苷Rh1,以及人参皂苷aPPD和人参皂苷Rc中的一种或两种组成。
优选的,人参皂苷由人参皂苷Rh1、人参皂苷aPPD和人参皂苷Rc组成,且三者的比例为人参皂苷Rh1:人参皂苷aPPD:人参皂苷Rc=2:1:1。
需要说明的是,本申请的低温保存溶液,原则上只要添加5-15μg/mL人参皂苷即可;但是,研究发现,人参皂苷Rh1、aPPD和Rc三者的使用效果较好;尤其是Rh1,与aPPD和Rc的一种或两种的组合效果较佳,其中又以人参皂苷Rh1:人参皂苷aPPD:人参皂苷Rc=2:1:1的效果最佳。
本申请的有益效果在于:
本申请的含有人参皂苷的成体干细胞低温保存溶液,通过血清、DMEM/F-12培养液、二甲基亚砜和人参皂苷的有机组合,能够减少冻存和复苏过程中成体干细胞的损伤,提高细胞复苏的成活率,为成体干细胞冻存提供了一种新的方案。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本申请进行详细说明。以下实施例仅用于对本申请进行说明,不应理解为对本申请的限制。
实施例
一、主要材料和仪器
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