[发明专利]一种可口革囊星虫抗菌肽及其应用

说明书

本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及可口革囊星虫抗菌肽制备及其应用，本发明首次公开了来源于星虫动物门的抗菌肽，首次从可口革囊星虫转录组文库中获取了一种新颖的Macin抗菌肽家族成员，命名为PhEs_Macin‑1。并采用固相化学合成的方法制备了PhEs_Macin‑1抗菌肽具有广谱抗菌活性的PhEs_Macin‑1_α多肽片段。该多肽片段对哈维氏弧菌和美人鱼发光杆菌等水产动物常见致病菌具有很强的抑杀活性，对金黄色葡萄球菌和副溶血弧菌等常见食源性致病菌也具有较强的抑杀活性。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种可口革囊星虫抗菌肽及其应用。

背景技术

星虫动物门的可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)，又名弓形革囊星虫，俗名“泥丁”、“泥虫”，为我国的特有地方种，其个体大、肉质鲜美、营养与药用保健价值高，在我国具有悠久的食用、药用历史，是广受欢迎的海产珍品之一。现代药理研究表明，可口革囊星虫富含星虫多糖、星虫多肽和纤溶酶等多种活性物质，具有保护心脑血管系统、调节免疫、抗疲劳和抗氧化等作用。此外，对可口革囊星虫体壁和体腔液的抗菌活性研究结果显示，其体壁和体腔液中存在抗菌活性物质，并且该活性物质对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性细菌具有明显的抗菌效果。然而，该活性物质的结构鉴定和制备纯化的方法有待进一步的研究，尚不能大规模制备应用。

海洋无脊椎动物由于缺乏高等脊椎动物的获得性免疫系统，只能依靠非特异性的先天性免疫系统抵御细菌、病毒和真菌等病害微生物的入侵。抗菌肽(antimicrobialpeptides，AMPs)作为先天性免疫系统的重要组成部分，广泛存在于海洋无脊椎动物中，不仅可以作为抗菌活性物质直接抑制杀灭病害微生物，而且可以作为免疫效应分子协调宿主免疫防御系统，是海洋无脊椎动物抵御病害微生物入侵的重要免疫防御机制。目前，已经从刺胞动物、环节动物、软体动物、甲壳动物和棘皮动物等海洋无脊椎动物中发现水母素、贻贝素、防御素、沙虫素、对虾抗菌素和绿球海胆素等广谱抗菌的新型抗菌肽。然而，目前海洋特有的星虫动物门中尚未有抗菌肽被发现和鉴定的研究报道。

天然的抗菌肽通常由有10～60个氨基酸组成小分子多肽，通常具有广谱抗菌性，对病毒、细菌、真菌和寄生虫等具有明显的抑制杀灭作用。抗菌肽一般带正电荷，具有双亲性(亲脂和亲水)，通常具有α螺旋、β折叠和β发夹等二级结构。近年来，随着我国水产养殖业高速发展，水环境污染和病害生物的大量爆发，制约了水产养殖业的可持续发展。目前，水产养殖业中主要采用抗生素和化学药物防治养殖动物的病害。抗生素和化学药物的大量使用会导致严重的药物残留和病害菌的耐药性增加。然而，天然抗菌肽热稳定性和水溶性较好，并且几乎不会产生耐药性，是一种生物安全的新型抗生素，不仅可替代传统抗生素直接抑杀病害生物，还能增强养殖动物的免疫力，提高生产效益。Macin抗菌肽家族成员是一种带正电荷的分泌性多肽，富含半胱氨基酸，具有广谱抗菌性，2004年首次在环节动物肠蛭(Theromyzon tessulatum)中发现Macin抗菌肽家族成员基因。然而，作为广西北部湾特色海水养殖品种可口革囊星虫中尚未有相关的抗菌肽研究的报道。

发明内容

鉴于上述内容，本申请提供一种PhEs_Macin-1_α抗菌肽，可以用作水产养殖中生态安全的抗菌添加剂，具有广泛的应用前景。

为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

本发明提供一种可口革囊星虫PhEs_Macin-1抗菌肽，所述抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；具体为：

MAVMRSLGLVLGCCLLVAVMWAPPAEGALCYTSWSRCSRWSSWGTGWLWKSCNDRCKELGRRGGRCRLADAKDCPLVKKAYQCQCY。