[发明专利]中国对虾雌性特异性基因及其检测引物和应用

说明书

本发明公开了中国对虾雌性特异性基因及其检测引物和应用。所述特异性基因的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示，用于检测的特异性引物的序列为：Female‑specific‑F：5’‑TGGATGCAGCAGGATTAAGGA‑3’；Female‑specific‑R：5’‑ACACACCCATCTCTAGCAGG‑3’。本发明利用该特异性引物对待测对虾的基因组DNA进行PCR扩增，其扩增产物若出现220bp和378bp两条条带时判定为雌性中国对虾，若只出现378bp条带时判定为雄性中国对虾。本发明的特异性引物特异性强，鉴定方法简单快速准确，尤其适合中国对虾早期遗传性别鉴定。

技术领域

本发明属于海洋虾类性别鉴定技术，具体涉及中国对虾雌性特异性基因及其检测引物和应用。

背景技术

中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)属节肢动物门(Arthropoda)、甲壳纲(Crustacea)、十足目(Decapoda)、对虾科(Penaeidae)，又称东方对虾，俗称对虾、明虾，主要分布于黄渤海(包括朝鲜西岸)以及东海北部的嵊泗列岛和舟山群岛一带，是我国最具代表性的海水经济养殖动物之一，并在国际市场上享有较高的声誉。中国对虾属广温、广盐性、一年生暖水性大型洄游虾类，在黄、渤海区有明显的洄游习性，分为越冬洄游和生殖洄游，其产卵期在4～6月间，怀卵量30～100万粒。近年来中国对虾的年养殖产量稳定在4-5万吨，养殖区域主要分布在长江以北的江苏、山东、天津、河北和辽宁等黄渤海沿岸地区。

目前，中国对虾主要通过外观辨别雌雄。性成熟的雌虾体长在18cm～23cm，体重60g～80g，呈青绿色；成熟的雄虾体长在13cm～17cm，体重30g～40g，呈黄褐色；雌虾平均体重比雄虾重一倍以上，因而其市场价值也大大高于雄性个体。并且中国对虾上市规格、等级的不同，也会极大地影响养殖经济效益。因此，建立中国对虾单性育种和养殖技术，将有助于提高养殖产量，增加渔民收入。但是，中国对虾幼虾特别是发育早期的幼体很难通过外观辨别雌雄，也尚无通过分子技术对中国对虾进行性别鉴定的方法，这极大阻碍了其单性育种和养殖产业的发展。

研究表明中国对虾性别决定类型为ZW型，即雌性为ZW型，而雄性为ZZ型。中国对虾已发布的参考基因组是基于雄性个体进行组装。本发明根据雌雄中国对虾重测序数据，组装了雌性W染色体特异序列，并基于该特异序列开发了雌性特异性引物。

发明内容

本发明提供了中国对虾雌性特异性基因及其检测引物和应用，其能够大规模快速准确地鉴定生长各种时期，尤其是发育早期的中国对虾的遗传性别。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明提供了中国对虾雌性特异性基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。

本发明还提供了中国对虾雌性特异性引物，用于检测所述的中国对虾雌性特异性基因，其核苷酸序列为：

Female-specific-F：5’-TGGATGCAGCAGGATTAAGGA-3’；

Female-specific-R：5’-ACACACCCATCTCTAGCAGG-3’。

本发明还提供了一种用于鉴定中国对虾遗传性别的试剂盒，所述试剂盒中包含权利要求2所述的中国对虾雌性特异性引物。

本发明还提供了所述的中国对虾雌性特异性引物在鉴定中国对虾遗传性别中的应用。

本发明还提供了一种鉴定中国对虾遗传性别的方法，所述方法包括利用所述的中国对虾雌性特异性引物进行检测的步骤。