[发明专利]一种诊断和治疗宫颈癌的circRNA标志物及其应用

说明书

本发明公开了一种宫颈癌circRNA标志物及其应用，属于生物技术领域。发明人研究发现，环状RNA hsa_circ_0002828在宫颈癌患者的血浆中，相比于健康人的血浆，表达水平显著降低，由此提示，hsa_circ_0002828可作为宫颈癌的诊断标志物，用于预测宫颈癌的发生。同时，hsa_circ_0002828过表达后，能够显著抑制宫颈癌胞的增殖能力和侵袭能力，并强烈诱导肿瘤细胞凋亡。这些结果说明hsa_circ_0002828既可以作为肿瘤诊断的标志物，也可以作为一种肿瘤治疗的潜在靶标，有望应用于宫颈癌的诊断和治疗中。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种宫颈癌circRNA标志物及其应用。

背景技术

宫颈癌是全球女性癌症死亡的第三大原因，仅次于乳腺癌和结直肠癌。宫颈癌是原发于子宫颈部位的恶性肿瘤，是最常见的妇科恶性肿瘤之一，原位癌高发年龄为30～35岁，浸润癌为45～55岁，近年来其发病有年轻化的趋势。近几十年宫颈细胞学筛查的普遍应用，使宫颈癌和癌前病变得以早期发现和治疗，宫颈癌的发病率和死亡率已有明显下降。宫颈癌广泛性根治手术经过100多年的发展,技术逐渐规范化、成熟化，早期宫颈癌患者手术治疗疗效明确，五年生存率可高达80%以上，但术后复发转移仍严重威胁患者的生命。

近几十年来，宫颈癌RNA分子的研究热度有增无减，特别是系统生物学的出现，让研究者们尝试从分子网络的角度解读和阐述宫颈癌的发生和进展，这也将成为未来研究的趋势。环状RNA(circular RNA, circRNA)是一类内源性非编码RNA，广泛存在于各种真核细胞中，没有5’端帽子结构和3’端poly A尾巴结构，通过反向剪接形成不同于线性RNA的共价闭合环状RNA分子，不受RNA外切酶影响，具有进化保守性。一般认为，circRNA可作为miRNA海绵，参与选择性剪接和基因转录调控，并具有与RNA结合蛋白相互作用和衍生假基因等功能，可能与人类癌症的发生和进展有关。

发明内容

本发明的目的在于提供一种宫颈癌circRNA标志物，即hsa_circ_0002828环状RNA（Circ0002828）基因，并进一步提供该标志物在宫颈癌的诊断、治疗中的应用。

本发明的发明构思：

Argonaute RISC催化组分3 AGO3（Argonaute RISC Catalytic Component 3，Argonaute 3）又名真核翻译起始因子2C, 3 （Eukaryotic Translation InitiationFactor 2C, 3或者EIF2C3）编码在RNA干扰中起作用的Argonaute蛋白家族的成员，包含一个PAZ结构域和一个PIWI结构域。研究发现AGO3作为 RNA 诱导的沉默复合物 (RISC) 的关键组成部分，通过 RNA 干扰负调控基因表达 (J Biol Chem)。AGO 复合物通过与互补的microRNA 结合来抑制 mRNA 靶标，从而使 mRNA 不稳定或降解。越来越多的研究表明，AGO亚家族的失调与癌变有关，AGO 可以调节各种肿瘤中的细胞增殖和/或活动性。在宫颈癌中， AGO3蛋白通过调节Wnt/β-catenin信号通路促进宫颈癌的恶性潜能（Reprod Biol.2021），这说明AGO3（mRNA翻译的）蛋白在宫颈癌中发挥促癌作用。

申请人经过一系列实验结果发现：来源于AGO3基因的circRNA hsa_circ_0002828在宫颈癌中显著低表达，且过表达hsa_circ_0002828后显著抑制了宫颈癌细胞的恶性表型，这说明hsa_circ_0002828可发挥与AGO3蛋白相反的作用。通过检测hsa_circ_0002828丢失（表达降低）也可提前对宫颈癌的发生进行诊断（或预警），而通过对hsa_circ_0002828进行过表达（增加表达）则具有治疗宫颈癌的临床应用价值。

本发明通过以下技术方案实现：