[发明专利]一种单人份S100β蛋白化学发光测定试剂盒及其测定方法

说明书

本发明公开了一种单人份S100β蛋白化学发光测定试剂盒，包括单人份包装的检测试剂，所述检测试剂包括第一试剂、第二试剂、洗液、底物液，第一试剂为羧基磁微球包被的S100β抗体溶液；第二试剂为由标记物标记的S100β抗体；还公开了一种单人份S100β蛋白化学发光测定方法。本发明采用羧基磁微球包被S100β抗体，标记物标记S100β抗体的酶促化学发光法对S100β进行定量检测，其灵敏度、重复性等均优于免疫层析法；且试剂单人份包装，可随到随检，无开瓶有效期限制及污染等，是提升基层检验水平的重要装备。

技术领域

本发明涉及S100β蛋白检测技术领域，特别是涉及一种单人份S100蛋白化学发光测定试剂盒及其测定方法。

背景技术

S100蛋白是1965年由Moore BW在牛脑中发现的，因该蛋白能溶解于100％硫酸铵中而得名。其由两个亚单位α、β结合形成S100αα、S100αβ、S100ββ。其中S100β蛋白由两个β亚基通过半胱氨酸残基形成二硫键组成，分子量为21KD的酸性钙结合蛋白，是S100家族中在脑内主要的和最具活性的成员。约96％的S100β蛋白以二聚体活性形式存在于脑内星形胶质细胞中，故被称为中枢神经特异蛋白，也被称为脑的“C反应蛋白”。

S100-β蛋白具有广泛的生物学活性，生理浓度时是一种神经营养因子，在神经胶质细胞的生长、繁殖、分化、基因表达、细胞凋亡中发挥重要作用，促进脑的发育。脑中S100-β蛋白在胚胎期第14d即有微弱表达，后与神经系统生长发育呈正相关。成年后相对稳定，正常成人血清中含量＜0.2ng/mL。当脑外伤、脑梗塞等造成神经胶质细胞膜受损时，S100-β蛋白释放至细胞外间隙，并通过受损的血脑屏障进入脑脊液和血液，从而导致血液中S100-β蛋白的浓度升高。过高浓度的S100-β蛋白具有神经毒性作用，可加重神经系统炎症，从而导致功能紊乱，影响钙动态平衡而导致细胞死亡。因此，对于S100-β蛋白准确、灵敏、快速的检测，对临床诊断脑损伤具有重要意义。

目前，市场用于检测S100β蛋白的试剂盒主要基于电化学发光法、化学发光法、免疫层析法、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、胶乳增强免疫比浊法等。其中免疫层析法操作简便快捷，但灵敏度较低，易受杂散光干扰；ELISA试剂盒具有操作流程繁琐，检测时间长，产生较多具有样本污染的废液等缺点；市面上的胶乳增强免疫比浊法、电化学发光法成本较高、检测时间长，且需要价格昂贵的配套全自动分析系统进行检测。另外，目前市场上的检测S100β蛋白的试剂盒均为多人份检测使用，需要额外配备洗液、底物液、反应杯等耗材，还有开瓶有效期及污染等问题。

因此亟需提供一种新型的S100β蛋白检测试剂盒来解决上述问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种单人份S100β蛋白化学发光测定试剂盒及其测定方法，能够对S100β蛋白进行定量检测且实现单人份包装检测。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种单人份S100β蛋白化学发光测定试剂盒，包括单人份包装的检测试剂，所述检测试剂包括：

第一试剂，为羧基磁微球包被的S100β抗体溶液；和

第二试剂，为由标记物标记的S100β抗体；和/或

洗液；和/或

底物液。

在本发明一个较佳实施例中，所述第一试剂的浓度为300-1000ug/ml。

在本发明一个较佳实施例中，所述第二试剂的浓度为0.050-0.300ug/ml。

其中，所述标记物采用碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶的一种或两种。

在本发明一个较佳实施例中，所述洗液按质量份数包括：