[发明专利]口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型及其构建方法在审
申请号: | 202210936220.X | 申请日: | 2022-08-05 |
公开(公告)号: | CN115956539A | 公开(公告)日: | 2023-04-14 |
发明(设计)人: | 陶小安;程斌;李围;夏娟;凌子航;吴桐 | 申请(专利权)人: | 中山大学附属口腔医院 |
主分类号: | A01K67/027 | 分类号: | A01K67/027 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 费雯 |
地址: | 510060 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 口腔 上皮细胞 条件 slc1a5 基因 小鼠 模型 及其 构建 方法 | ||
1.一种口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将Slc1a5tm1.1cyagen纯合子Flox小鼠净化后获得杂合子Slc1a5fl/-小鼠;
(2)将杂合子Slc1a5fl/-小鼠与C57BL/6野生型小鼠交配,获得Slc1a5fl/fl纯合子小鼠;
(3)将Slc1a5fl/fl纯合子小鼠与Krt14-Cre ERTAM小鼠交配获得Slc1a5fl/-Cre+/-小鼠;
(4)将Slc1a5fl/-Cre+/-小鼠和Slc1a5fl/fl小鼠交配,获得Slc1a5fl/flCre+/-小鼠;
(5)采用诱导剂诱导Slc1a5fl/flCre+/-小鼠,得所述口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型。
2.根据权利要求1所述的口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述诱导剂为他莫昔芬。
3.根据权利要求2所述的口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述他莫昔芬的使用剂量为75mg/kg。
4.根据权利要求1所述的口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述步骤(1)、步骤(3)和步骤(5)包括对获得的小鼠进行基因型鉴定。
5.根据权利要求4所述的口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述步骤(1)对获得的小鼠进行基因型鉴定的引物的核苷酸序列如SEQ IDNO.1和SEQ ID NO.2所示。
6.根据权利要求4所述的口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述步骤(3)对获得的小鼠进行基因型鉴定的引物的核苷酸序列如SEQ IDNO.3和SEQ ID NO.4所示。
7.根据权利要求4所述的口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述步骤(5)对获得的小鼠进行基因型鉴定的引物的核苷酸序列如SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6所示。
8.一种口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型,其特征在于,采用权利要求1~7任一项所述的口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型的构建方法制备得到。
9.根据权利要求8所述的口腔上皮细胞条件性敲除SLC1A5基因小鼠模型在口腔疾病研究中的应用。
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